rt-pcr(rt pcr)和qpcr公司(qpcr)的区别
聚合酶链反应是一种在体外扩增特定区域DNA的技术。由于Kary Mullis在1983年发明了这项技术,科学家们能够为研究目的复制数千到数百万个特定的DN**段。目前,它已成为临床和研究实验室中常见的常规技术,有着广泛的应用。传统的PCR技术有RT-PCR、套式PCR、多重PCR、Q-PCR、RT-QPCR等多种方法,RT-PCR和Q-PCR是PCR的两个重要变体。RT-PCR与Q-PCR的主要区别在于RT-PCR是通过RNA产生互补DNA(cDNA)转录物来检测基因表达,而Q-PCR则是用荧光染料实时定量检测PCR产物。
内容1。概述和主要区别2。什么是RT-PCR 3。什么是QPCR4。并行比较——RT PCR与QPCR5。摘要
什么是rt-pcr(rt pcr)?
逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)是PCR的一种变体,用于检测RNA的表达。它是检测组织中mRNA表达的一种非常重要的方法。当样品的起始材料是RNA时,采用RT-PCR方法。在RT-PCR中,模板mRNA首先转化为互补DNA。这一步是由反转录酶催化的,这个过程被称为反转录。其次,对新合成的cDNA采用传统的PCR方法进行扩增。
RT-PCR是一种高度敏感的技术,需要相对较少的RNA样本。RT-PCR常用于RNA种类的诊断和定量,特别是RNA病毒,如人类免疫缺陷病毒和丙型肝炎病毒。
什么是qpcr公司(qpcr)?
定量PCR(qpr)是PCR的一种变体,用于定量检测PCR产物。由于它使用实时PCR机实时检测扩增,因此也被称为实时聚合酶链反应。它是一种确定样本中存在的目标序列或基因数量的合适方法。QPCR的有趣特点是它将放大和真实量化结合到一个步骤中。因此,QPCR技术可以消除凝胶电泳检测的必要性。qpr在PCR反应过程中使用荧光染料标记PCR产物,最终直接定量。当PCR产物积累时,荧光信号也会被累积,并由实时机器进行测量。QPCR可与RT-PCR结合。它被称为RT-QPCR或QRT-PCR,被认为是检测细胞或组织中RNA水平的最有力、最灵敏和定量的方法。
sybrgreen和Taqman是检测或观察实时PCR扩增过程的两种方法。SYBR-Green法是用一种叫做SYBR-Green的荧光染料进行的,通过结合染料产生双链DNA来检测扩增。Taqman使用双标记探针进行,并通过Taq聚合酶降解探针和释放荧光团来检测扩增,如图02所示。两种方法都可以监控放大过程的进度,并实时报告产品的数量。
实时PCR在基因表达定量、microRNA和非编码RNA分析、SNP基因分型、拷贝数变异检测、稀有突变检测、转基因生物检测、传染源检测等方面有着广泛的应用。
rt-pcr(rt pcr)和qpcr公司(qpcr)的区别
RT-PCR与QPCR | |
RT-PCR是一种通过扩增检测基因表达的技术。 | QPCR是一种实时扩增DNA并定量PCR产物的技术。 |
逆转录酶的参与 | |
逆转录酶用于RT-PCR。 | 酶逆转录酶不用于QPCR。 |
荧光标记分子的使用 | |
荧光标记染料或探针不用于RT-PCR。 | 荧光标记染料或探针用于QPCR。 |
PCR产物的定量 | |
除非与QPCR结合,否则RT-PCR不能定量PCR产物。 | 定量测定PCR产物。 |
起始物料 | |
起始物质是mRNA。 | 起始物质是DNA。 |
cDNA的合成 | |
在RT-PCR过程中产生互补DNA。 | QPCR过程中不产生互补DNA。 |
总结 - rt-pcr(rt pcr) vs. qpcr公司(qpcr)
RT-PCR和QPCR是传统PCR的两个版本。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术是对mRNA样品进行的,它是由反转录和cDNA的产生驱动的。QPCR用于荧光染料或标记探针在实时PCR热循环中定量PCR产物。在QPCR中,PCR产物的数量由样品发射的荧光信号来表示。RT-PCR是一种常用的扩增方法,QPCR则是一种常用的定量方法。这就是RT-PCR和QPCR的区别。
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