重组蛋白表达是指制造一种来自重组DNA的蛋白质。它是分子生物学和药物生产中激素替代物的一种常见技术。重组DNA是基因的特定部分,旨在宿主细胞内表达单一产品,在特殊化学因素的引导下,使正确的蛋白质得到大量表达。许多历史上来自动物来源的激素和酶,现在通过重组蛋白表达来合成,然后从宿主细胞中收获和提炼。
为了表达重组蛋白,必须将精心挑选的DNA序列引入宿主的基因组中。从一个生物体中提取部分遗传密码并将其放入另一个生物体的细胞核中是一种克隆形式。这是通过将编码所需蛋白质的重组DNA序列插入细胞核,通过将其转录为RNA启动基因的表达。当携带DNA信息的mRNA片段从细胞核迁移到核糖体,并在那里根据特定模板启动蛋白质的生产时,重组蛋白质就被组装起来。
除非用适当的载体引入DNA,使正确的遗传信息得到充分的表达,否则宿主细胞将不能制造足够数量的重组蛋白。蛋白质表达因子是重组DNA插入宿主细胞时必须伴随的分子信号,以确保目标蛋白质将被过度表达。这是重组蛋白表达的唯一方式,可以制造出足够的物质用于制药或实验室用途。
核糖体蛋白的组装并没有完成蛋白质的表达过程,因为在收获过程中,细菌或酵母细胞内容物会与最终产品混合在一起。表达的重组蛋白必须通过与被破坏的细胞部分的碎片分离来进行纯化。有时,一个分子标签会对蛋白质进行标记,这样它就能与金属或其他物质结合,并从废物中分离出来。存在不同的技术,取决于蛋白质大小和宿主细胞的复杂性等因素。
人类重组蛋白的表达具有广泛的商业和医疗应用。许多激素、抗体和酶以前都是从动物或尸体组织中提取的,但现在使用重组DNA技术进行合成生产。两个特别重要的例子是人类生长激素和胰岛素。许多激素替代疗法依赖于合成蛋白质,分子和细胞生物学家在实验室中使用的各种检测方法也是如此。在许多情况下,细菌被用作简单产品的宿主细胞,而更复杂的重组蛋白表达,特别是来自动物的基因,可能在真菌和酵母中完成。
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