基因组库是包含特定生物体总染色体DNA的两种DNA库之一。在基因组库中,不同的DNA**物存储在一个相同载体的群体中。为了制备一个特定生物体的基因组库,基因组DNA应该从生物体中分离出来。限制酶在特定的DNA序列中消化基因组DNA,从而产生基因组DN**段。每个片段可能包含一个或两个基因。这些片段***到特定类型的载体中,并转化为宿主细菌,以制备DNA克隆。
1.什么是基因组文库-定义,事实2.基因组文库是如何产生的-程序,效价,筛选
关键词:基因组文库,效价,限制性消化,筛选
基因组文库是一组DNA克隆,代表特定生物体的全部DNA内容。DNA克隆在微生物中通过复制繁殖。基因组文库允许研究人员从文库中分离出感兴趣的DN**段进行研究。基因组文库是全基因组测序的重要组成部分。
基因组文库的制备步骤如下所述。
表1:媒介容量
向量类型 | **大小 |
质粒 | 10 kb |
噬菌体lambda | 20 kb |
粘粒 | 45 kb |
噬菌体P1 | 70-100 kb |
P1人工染色体(PAC) | 130-150 kb |
细菌人工染色体(BAC) | 120-300 kb |
酵母人工染色体(YAC) | 250-2000 kb |
4.转化为宿主-在大多数情况下,宿主是细菌或酵母。在宿主的复制过程中形成了特定DN**段的克隆。
Figure 1: Genomic Library Preparation
该文库的效价使研究人员能够了解样本中有多少转化的宿主细胞。它是通过稀释转化的细胞和计算每体积的细胞数来实现的。
筛选允许从文库中分离特定的DN**段。主要有两种方法,一种是直接选择重组子,另一种是检测表达。直接选择可以通过PCR和菌落杂交进行。
基因组文库是一组DN**段的集合,这些片段代表了特定生物体基因组中的全部DNA含量。它是通过将基因组的片段DNA**载体中,并将重组分子转化到宿主细胞中进行繁殖而产生的。
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