TBE和TAE在分子生物学中用作缓冲液,主要用于核酸电泳。Tris缓冲液用于稍碱性的pH条件下,如DNA电泳,因为这会使DNA在溶液中可溶并脱质子,因此它会被吸引到正极并通过凝胶迁移。EDTA是溶液中的一种成分,因为这种常见的螯合剂可以防止核酸被酶降解。EDTA螯合二价阳离子,二价阳离子是可能污染样品的核酸酶的辅因子。然而,由于镁离子是DNA聚合酶和限制性内切酶的辅助因子,因此有意将EDTA的浓度保持在较低的水平(约1mm浓度)。
您不需要对溶液进行消毒。虽然沉淀可能在一段时间后发生,但储备溶液仍然可用。您可以使用pH计调整pH值,并逐滴添加浓盐酸(HCl)。在室温下储存TBE缓冲液是可以的,尽管您可能希望通过0.22微米的过滤器过滤原液,以去除会促进沉淀的颗粒。
在室温下储存一瓶10倍的缓冲溶液。冷藏会加速降水。
使用前先将溶液稀释。用去离子水将100毫升10倍的储备溶液稀释至1升。
5X溶液的优点是不易沉淀。
准备
偶然使用5倍或10倍的储备溶液会给你带来糟糕的结果,因为会产生同样多的热量。除了分辨率差外,样品可能会损坏。
准备
将100毫升5X TBE溶液加入900毫升蒸馏去离子水中。使用前彻底搅拌。
尽管TBE和TAE是常见的电泳缓冲液,但对于低摩尔浓度的导电溶液,还有其他选择,包括硼酸锂缓冲液和硼酸钠缓冲液。TBE和TAE的问题在于,基于Tris的缓冲液限制了电泳中可以使用的电场,因为过多的电荷会导致温度失控。
...这种化合物在7.0到9.0的pH范围内效果更好。可用于SDS-PAGE缓冲液的制备。 图01:Tris分子的化学结构 什么是特里斯基地(tris base)? 三基或三羟甲基氨基甲烷是化学式为C4H11NO3的化合物。我们可以把这个化合物缩写为THAM。Tris碱是一种...
.... 并列比较-电泳与介电泳的表格形式 5. 摘要 什么是电泳(electrophoresis)? 电泳是一种分析技术,它可以利用样品中化学物质的电学性质来分析样品。在这里,我们可以观察到分散的溶质在所分析的介质中的运动。因此,我们可以...
...氢离子或氢离子时对pH值变化的抵抗力。我们可以用改变缓冲液pH值所需的酸或碱的量除以pH值的变化和缓冲溶液的体积来计算这个值。 图01:显示系统缓冲容量的示例图 由于溶液中存在的缓冲剂消耗了添加到缓冲溶液中的酸或...
...2D表格形式的凝胶电泳 6. 摘要 什么是一维凝胶电泳(1d gel electrophoresis)? 一维凝胶电泳又称一维凝胶电泳,是一种基于分子量的蛋白质分离方法。蛋白质分离主要采用聚丙烯酰胺凝胶电泳。基于凝胶电泳的概念,分子根据其分子...
...被称为THAM。它是一种有机化合物,用作缓冲溶液TAE和TBE缓冲液的成分。 图1:Tris碱的化学结构 这种化合物含有一个伯胺基。因此,它可以进行典型伯胺所经历的反应,例如:与醛的缩合反应。这种化合物的基本性质是由这个胺基...
...电泳的表格形式 6. 摘要 什么是水平凝胶电泳(horizontal gel electrophoresis)? 水平凝胶电泳是根据DNA、RNA或蛋白质分子的大小和电荷来分离它们的基本理论。在这种技术中,凝胶以水平方向存在,并浸入连续的缓冲液中。琼脂糖凝胶...
...电泳和凝胶电泳的表格形式 6. 摘要 什么是凝胶电泳(gel electrophoresis)? 凝胶电泳是一种根据电荷、大小和形状分离核酸、蛋白质或氨基酸的技术。这项技术使用一种物理凝胶,它是一种聚合物物质,作为分离介质。最常用的凝胶...
凝胶电泳(gel electrophoresis)和电泳(sds page)的区别 凝胶电泳是一种在电场中分离大分子的技术。根据分子生物学中的大小,把RNA和蛋白质分开是一种常见的方法。SDS-Page是一种凝胶电泳,用于根据蛋白质的大小从蛋白质混合物中...
.... 并排比较-电泳和色谱法的表格形式 5. 摘要 什么是电泳(electrophoresis)? 电泳是一种实验室技术,我们利用样品中存在的化学物质的电性质来分析样品。在那里,我们可以观察到分散粒子在样品中的运动。因此,我们可以确定化...
SDS-PAGE与凝胶电泳 电泳可以用来确定物体的质量,通常用于蛋白质和脱氧核糖核酸(DNA)。当DNA链被引入化学物质时,可能会加速或减慢信息处理。已知质量的DNA标记被用来估计电泳结束后物体的大小。电泳很可能是分子生物...