什么是泛素化分析？(an ubiquitination assay?)

泛素化是指蛋白质泛素通过三种不同的酶与其他蛋白质结合。泛素化分析是一种测定细胞内有多少这一过程发生的测试。测试可用于确定不同条件如何影响蛋白质结合、泛素途径中重要的步骤和结构以及细胞中蛋白质的数量。数量不足或过多与许多不同疾病的发展有关。...

泛素化是指蛋白质泛素通过三种不同的酶与其他蛋白质结合。泛素化分析是一种测定细胞内有多少这一过程发生的测试。测试可用于确定不同条件如何影响蛋白质结合、泛素途径中重要的步骤和结构以及细胞中蛋白质的数量。数量不足或过多与许多不同疾病的发展有关。

泛素是一种存在于细胞中的蛋白质，其功能是与蛋白质结合，同时作为“标签”或其他结构的信号。这个“标签”然后向酶发出信号，让酶知道蛋白质可以被破坏、回收或移动。结果是蛋白质的破坏或运输。

这些标记蛋白对DNA修复、病毒感染和免疫反应都很重要。其他重要功能包括细胞死亡、细胞分裂和细胞发育。泛素过多或缺乏可能在许多疾病的形成中发挥作用，如癌症、遗传性疾病和免疫系统疾病。

研究人员将使用泛素化分析来确定哪些条件会改变细胞中蛋白质的浓度，并将患病细胞与健康细胞进行比较。科学家还利用它来研究什么条件会导致结合的变化。此外，他们可能会尝试将特定的DNA代码和细胞内酶的数量联系起来。

研究科学家专门使用的泛素化分析方法不止一种。我们将确定与泛素结合的蛋白质的百分比。另一个研究酶的活性或泛素化途径中发现的任何其他中间产物的存在。根据泛素将结合到的靶蛋白开发了不同的分析方法。

泛素化分析的基础是加入一种化合物，该化合物使用另一种易于测量的化学物质进行标记。在肿瘤学分析中，泛素可以用隐酸盐标记，隐酸盐是一种含有两个氮原子的化合物。这可以用来确定细胞中哪种酶最活跃。

泛素化分析有两个步骤。第一步是酶促步骤，酶将标记的泛素与目标蛋白质结合。第二个是检测步骤，在该步骤中，使用诸如抗体的结合物来检测目标蛋白的结合。抗体会发出荧光，或者改变颜色，这让研究人员能够确定酶的活性。

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