在凝胶电泳中,电流被施加到含有DNA、RNA或蛋白质样本的凝胶基质上。电流使蛋白质或核酸分子在凝胶中移动,使不同大小的分子得以分离。这项技术被用来检测或从核酸或蛋白质的混合物中分离出特定大小的分子。
凝胶电泳方案的第一步是将一块凝胶放在一个小的保温箱中。凝胶是由一种在室温下形成固体的化合物制成的,并带有中性电荷。然后在盛放凝胶块的容器中注入足够的特殊凝胶电泳缓冲液,使其完全覆盖凝胶。
在凝胶块的一端是一系列的小孔。每个孔中加入少量的DNA或蛋白质样品。每个单孔包含一个带有未知核酸或蛋白质混合物的实验样品。另外一个孔包含一个对照样品,其中有已知大小的核酸或蛋白质的混合物。每个样品,包括对照样品,都已与一种染料混合,以帮助在电泳完成后识别样品的位置。
一旦所有这些设置工作完成,电泳就会通过向放置凝胶的容器中施加电流而开始进行。电流推动样品分子通过凝胶,其速度与分子的大小成正比。较小的分子快速通过凝胶,而较大的分子则缓慢通过。随着分子的移动,它们根据其大小在凝胶上分离出来。
当彩色染料到达凝胶的另一端时,电流被移除,凝胶被一种能增强染料颜色的溶液染色。最后,通过测量每个分子在电泳时间内走了多远来 "读取 "凝胶。这一信息可用于计算每个样品中每个分子的大小。
有几种不同类型的实验技术使用电泳。在南方印迹中,琼脂糖凝胶电泳被用来分离DNA或RNA的片段。西方印迹使用聚丙烯酰胺凝胶电泳从混合物中分离出蛋白质。这些技术中的每一种都是用来寻找某种预先确定的核酸或蛋白质的序列。电泳和印迹技术被用于生物研究的许多领域,以及医学和法医科学中。
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