关键区别——dna和rna提取
DNA和RNA的研究是理解分子生物学、生物技术和遗传学的基本概念的重要方面。提取纯DNA和RNA样本是必要的,以便在这些研究中进行实验程序。DNA提取和RNA提取的关键区别在于DNA提取过程净化DNA,RNA提取纯化RNA。DNA提取过程有三个不同的步骤:细胞膜脂和蛋白质的分解代谢、浓盐溶液中分解代谢物的**和DNA与乙醇的沉淀。三步程序可包括两个可选步骤。RNA纯化过程包括四个步骤:加入硫氰酸胍进行细胞裂解、蛋白质变性(包括核糖核酸酶)、加入氯仿和苯酚分离RNA以及用乙醇洗涤沉淀。
目录
1. 概述和主要区别
2. 什么是DNA提取
3. 什么是RNA提取
4. DNA和RNA提取的相似性
5. 并列比较-DNA和RNA提取的表格形式
6. 摘要
什么是dna提取(dna extraction)?
DNA提取是从样品中提取DNA的物理化学过程。DNA提取是分子生物学和法医学研究的一个重要方面。这个过程包括三个基本步骤。首先,应该获得感兴趣的细胞。接下来,细胞裂解是为了打破细胞膜,打开细胞,使细胞质和DNA一起暴露。表面活性剂或其他清洁剂可用于溶解细胞膜上的脂质,而蛋白质则被蛋白酶分解。这是可选步骤。一旦细胞被溶解,高浓度的盐溶液会促进分解后分子的**。然后对溶液进行离心分离,从DNA中分离出碎片块。在这个阶段,分化的DNA与细胞周期中使用的试剂和盐混合。
为了进一步净化它,可以使用以下步骤。一种方法是乙醇沉淀法,即将冰冻的乙醇与分离的DNA样本混合。DNA不溶于酒精,因此由于DNA分子**在一起而产生颗粒。在此过程中加入乙酸钠,通过增加离子强度来提高沉淀度。除乙醇沉淀法外,苯酚氯仿萃取法也可用于此。在这种方法中,苯酚使样品中的蛋白质变性。一旦离心,变性蛋白质将保留在有机相中,而与氯仿混合的DNA分子将存在于水相中。氯仿可以去除苯酚残留物。提取完成后,DNA保持溶解在TE缓冲液或超纯水中。
什么是rna提取(rna extraction)?
RNA纯化是从生物样品中纯化RNA的过程。由于核糖核酸酶存在于细胞和组织中,这一过程非常复杂。核糖核酸酶具有快速降解RNA的能力。核糖核酸酶的化学性质非常稳定,很难使其失活。中和核糖核酸酶是一种选择。由于这种酶在细胞和组织中普遍存在,人们开发了提取RNA的特殊技术。在众多方法中,最常用的方法是硫氰酸胍-苯酚-氯仿萃取。
硫氰酸胍-苯酚-氯仿萃取法采用离心-相分离法。要离心的混合物由水样品和水饱和溶液组成,水饱和溶液由苯酚和氯仿组成。离心后,溶液在中性pH条件(pH 7-8)下由上部水相和下部有机相组成。RNA存在于水相中。有机相通常由溶解在苯酚中的蛋白质和溶解在氯仿中的脂类组成。加入了一种朝向性试剂(一种能够打破水分子间氢键的分子);这就是所谓的硫氰酸胍。这种试剂能够使蛋白质变性,其中包括核糖核酸酶,这些核糖核酸酶可以降解RNA,并参与细胞裂解。它还能从核糖体蛋白质中分离出rRNA。RNA纯化的最后一步是用乙醇洗涤水相的沉淀。RNA也可以用液氮纯化。
dna(dna)和rna提取(rna extraction)的共同点
- 两种提取过程都使用有害化学物质,如苯酚和氯仿。
- 离心分离是两种过程的基本技术。
- 乙醇用于洗涤沉淀,并获得纯化的DNA或RNA。
dna(dna)和rna提取(rna extraction)的区别
DNA与RNA提取 | |
DNA提取是从生物体或样品中提取DNA的过程。 | RNA提取是从样品中提取RNA的过程。 |
台阶 | |
DNA提取过程由三个不同的步骤和两个可选步骤组成。 | RNA提取过程由四个不同的步骤组成。 |
试剂 | |
表面活性剂、蛋白酶(可选)、乙醇、氯仿、苯酚、乙酸钠用于DNA提取。 | 用硫氰酸胍、氯仿、苯酚、乙醇提取RNA。 |
总结 - dna(dna) vs. rna提取(rna extraction)
DNA和RNA的提取是分子生物学、遗传学和生物技术研究的重要实验步骤。这两种方法都涉及相似的试剂,但是RNA提取使用一种特殊的试剂硫氰酸胍,这种试剂会降低核糖核酸酶的活性。这就是DNA和RNA提取的主要区别。
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引用
1Chomczynski,P和N Sacchi。“酸胍-硫氰酸盐-苯酚-氯仿萃取一步分离RNA的方法”,分析生物化学,美国国家医学图书馆,1987年4月,可在这里查阅。查阅日期:2017年8月31日。辛达维语。“DNA、RNA和蛋白质提取:过去和现在”,生物医药研究国际,2009年11月30日,印达威,可在这里查阅。2017年8月31日查阅。
2辛达维语。“DNA、RNA和蛋白质提取:过去和现在”,生物医学研究国际,新达威,2009年11月30日,