亲和层析和离子交换色谱的关键区别在于,我们可以使用亲和色谱分离混合物中带电荷或不带电的成分,而我们可以使用离子交换色谱分离混合物中的带电成分。
色谱法是一种我们可以用来分离混合物中所需成分的技术。液相色谱有液相色谱法、气相色谱法等不同类型,亲和色谱法和离子交换色谱法是液相色谱法的两大类。此外,在这些技术中,有两个阶段。也就是说,它们是固定相和流动相。这些技术的目的是根据组分在固定相表面上的结合,分离流动相中的组分。
目录
1. 概述和主要区别
2. 什么是亲和层析
3. 什么是离子交换色谱法
4. 并列比较-亲和色谱法与离子交换色谱法的表格形式
5. 摘要
什么是亲和层析(affinity chromatography)?
亲和层析是一种生物化学技术,我们利用这些成分之间的相互作用来分离混合物中的成分。
我们在本案例中使用的交互包括:
- Antigen-antibody interacti***
- Enzyme-substrate interacti***
- Receptor-ligand interacti***
- Protein-nucleic acid interacti***
在这项技术中,我们利用分子的分子特性进行分离。在这里,我们允许所需化合物通过氢键、离子相互作用、二硫键桥、疏水相互作用等与固定相相互作用。不与固定相作用的分子将首先洗脱。因此,我们可以把它从混合物中分离出来。所需化合物将保持在固定相上。因此,我们可以用洗脱溶剂将其分离,并使其洗脱分离。
亲和层析在使用缓冲溶液从混合物中纯化和浓缩物质时非常有用。此外,它有助于减少混合物中不需要的物质。当考虑我们用于这个过程的仪器时,我们应该使用一个充满固定相的柱。然后,我们应该加载包含我们要分离的生物分子的流动相。接下来,让它们与固定相结合。此后,使用洗涤缓冲液,我们可以分离非靶生物分子,但目标分子必须对固定相有很高的亲和力才能成功分离。
什么是离子交换色谱法(ion exchange chromatography)?
离子色谱法是一种可以分析离子物质的液相色谱法。通常,我们用它来分析无机阴离子和阳离子(即氯化物和硝酸盐阴离子以及钾、钠阳离子)。虽然不常见,但我们也能分析有机离子。此外,我们可以使用这种技术来纯化蛋白质,因为蛋白质是在一定pH值下带电的分子。在这里,我们使用一个固体固定相,带电粒子可以附着在上面。例如,我们可以用树脂聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物作为固体载体。
为了进一步解释这一点,固定相有固定离子,如硫酸盐阴离子或季胺阳离子。如果我们要维持这个系统的中性,每一个都应该与一个反离子(带相反电荷的离子)相联系。在这里,如果反离子是阳离子,那么我们将其命名为阳离子交换树脂。但是,如果反离子是阴离子,那么这个体系就是阴离子交换树脂。
离子交换过程有五个主要阶段;
- Initial stage
- Adsorption of target
- Starting of elution
- End of elution
- Regeneration
密切关系(affinity)和离子交换色谱法(ion exchange chromatography)的区别
亲和层析是一种生化技术,我们利用这些成分之间的相互作用来分离混合物中的组分,而离子色谱法是一种可以分析离子物质的液相色谱法。因此,亲和层析和离子交换色谱的主要区别在于,离子交换色谱只能用于离子物质的分离,而亲和层析则可以同时分离带电粒子和不带电粒子。当考虑其工作原理时,亲和层析和离子交换色谱的区别在于,由于目标分子对固定相有很高的亲和力,所以亲和色谱才得以进行。然而,对于离子交换色谱,目标分子的电荷与固定相表面的电荷相反。
下面的信息图显示了亲和层析和离子交换色谱的区别,作为并列比较。
总结 - 密切关系(affinity) vs. 离子交换色谱法(ion exchange chromatography)
总之,亲和层析和离子交换色谱是两种形式的液相色谱技术。亲和层析和离子交换色谱的关键区别在于,我们可以使用亲和色谱分离混合物中带电荷或不带电的成分,而我们可以使用离子交换色谱分离混合物中的带电成分。
引用
1“亲和层析”,维基百科,维基媒体基金会,2018年10月5日。这里有2个。歌词。“离子交换色谱法”,化学图书馆,图书馆,2016年12月29日
2歌词。“离子交换色谱法”,《化学文摘》,歌词,2016年12月29日。