ニトロセルロースとポリフッ化ビニリデン (pvdf)の違い

ウェスタンブロッティングは、タンパク質試料中の特定のタンパク質を検出し、定量することができる方法です。この技術の信頼性は、ゲルからタンパク質を吸収する適切な膜を選択することに依存します。微多孔膜にはさまざまな種類があります。ニトロセルロース膜は、その特異な性質から研究者に好んで使用されています。また、ニトロセルロースとポリフッ化ビニリデンを選択することもイムノブロッティングの課題である。ニトロセルロースもポリフッ化ビニリデンも高いタンパク質取り込み能力を有している。ニトロセルロース膜とPVDF膜の大きな違いは、ニトロセルロース膜には抗体を剥離し再利用する機能がないのに対し、PVDF膜には抗体を剥離し再利用する機能があることです。

目次1. 概要と主な違い2. ニトロセルロースとは3. PVDFとは4. 並べて比較 - ニトロセルロース vs PVDF5. まとめ

ニトロセルロースは何ですか？

ニトロセルロースはセルロースを硝酸で処理したポリマーで、分子生物学**において、特にサザンブロッティング、ノーザンブロッティング、ウェスタンブロッティングなどの手法で使用される微多孔膜の材料として使用されています。ニトロセルロース膜の孔径は3～20μm。ニトロセルロース微多孔膜は、膜表面で起こる免疫化学反応を検出するのに役立ちます。そのため、ニトロセルロース膜はタンパク質の固定化やイムノブロット法によく使用されます。ニトロセルロース膜は、糖タンパク質や核酸の固定化も可能です。

ニトロセルロース膜は、いくつかの特徴からラテラルフロー分析に好んで使用されます。ニトロセルロース膜は、高濃度のタンパク質を吸収する。膜を濡らすための溶媒は、ニトロセルロース膜タンパク質の取り込みを減少させない。ニトロセルロース膜は、目的のゲルサイズに簡単にカットでき、電気泳動やキャピラリー泳動でゲルから膜にタンパク質を移し替えることができます。ニトロセルロースは、タンパク質がより高い結合電位で膜を通過することができます。ニトロセルロースの方が加工強度が高い。また、無溶剤の耐水性接着剤で、さまざまなプラスチック基材に簡単に接着できるのもニトロセルロース膜の特徴です。

図01：ウェスタンブロッティング用ニトロセルロース膜

フッ化ビニリデン(pvdf)は何ですか？

ポリフッ化ビニリデン（PVDF）は、フッ化ビニリデンを重合したフッ素樹脂で、高いタンパク質固定化能を有しています。そのため、ポリフッ化ビニリデン（PVDF）製の微多孔膜は、タンパク質混合物の分析 ** 確定タンパク質に使用できます。 PVDF膜は、アミノ酸分析およびタンパク質配列決定にも使用可能です。ニトロセルロース膜に対するポリフッ化ビニリデン膜の最大の特徴は、抗体から容易に剥離し、その後の抗体プローブに再利用できることである。

PVDF膜はニトロセルロース膜に比べて厚いため、繰り返し使用しても破損しにくいという特徴があります。そのため、使用前にメタノールやイソプロパノールに浸しておく必要があります。

ニトロセルロースとポリフッ化ビニリデン (pvdf)の違い

概要 - ニトロセルロース vs. ポリフッ化ビニリデン (pvdf)

ニトロセルロース膜は、ラテラルフロー分析に初めて使用された膜である。タンパク質を吸収する能力が高いのです。そこで、ニトロセルロース膜をタンパク質ブロッティングに使用した。ポリフッ化ビニリデン（PVDF）もウェスタンブロッティングに使用される膜で、こちらも高いタンパク質吸着能力を有しています。どちらのタイプも、タンパク質解析のためのプロテインブロッティングに使用されます。しかし、PVDF膜はニトロセルロース膜よりもウェスタンブロッティングに適した特異的な性質を持っています。しかし、低分子量タンパク質の検出にはニトロセルロース膜が、高分子量タンパク質の検出にはPVDF膜が適している。これが、ニトロセルロース膜とポリフッ化ビニリデン膜の違いです。

画像提供：1. "ウェスタンブロット転写" By Bensaccount at English Wikipedia (CC BY 3.0) via Comm*** Wikimedia