アイソクラティック溶出とグラジエント溶出の大きな違いは、アイソクラティック溶出が移動相の濃度を一定に保つのに対し、グラジエント溶出は移動相の濃度を変化させることである。

クロマトグラフィーでは、アイソクラティック溶出とグラジエント溶出という用語が使われます。クロマトグラフィーでは、動かない物質である固定相と、動く物質である移動相を使用します。アイソクラティック溶出とグラジエント溶出は、移動相の性質を表しています。

カタログ

1. 概要と主な相違点 2. イソクラティック溶出とは 3. グラジエント溶出とは 4. 横並び比較 - 表形式でのアイソクラティックとグラジエント溶出 6. まとめ

アイソクラティック溶出は何ですか？

アイソクラティック溶出とは、クロマトグラフィーにおいて、移動相の濃度が一定である場合に用いられる用語である。ここで、移動相の濃度はクロマトグラフィーのプロセスを通じて一定である。この間、クロマトグラムでは保持時間と共にピーク幅が直線的に増加するのが観察されます。しかし、この場合、遅延溶出の後半のピークが非常に平坦でブロードになるという欠点もある。そのため、これらのブロードなピークはピークとして識別することが困難である。

また、等比級数溶出では、カラムサイズによる選択性の変化はありません。つまり、カラムサイズのばらつきに選択性が左右されないのだ。ここでは、長さと直径を柱の寸法として考えています。したがって、ピークは同じ順序で溶出する。

グラジエント溶出は何ですか？

グラジエント溶出とは、クロマトグラフィーにおいて、移動相の濃度が変化する場合に用いられる用語である。つまり、移動相の濃度が一定である必要はないのです。例えば、高速液体クロマトグラフィーでは、最初は10%のメタノールを使用し、徐々に濃度を上げて90%で終了する方法が一般的である。移動相には弱溶媒と強溶媒の2つの成分があります。弱溶媒は溶質をゆっくり溶かし、強溶媒は溶質を早く溶かします。逆相クロマトグラフィーでは、弱溶媒に水、強溶媒に有機溶媒を使用します。

図01：HPLC

また、グラジエント溶出法では、溶出後の画分が少なくなるため、溶出速度が速くなり、クロマトグラムに細いピークが現れるようになります。この方法では、ピークの形状や高さが改善されます。また、グラジエント溶出法では、カラムサイズによって溶出順序が異なる。

アイソクラティックとグラディエント溶出の違い

クロマトグラフィーでは、アイソクラティック溶出とグラジエント溶出という用語が使われます。アイソクラティック溶出とグラジエント溶出は、移動相の性質を表しています。アイソクラティック溶出とグラジエント溶出の大きな違いは、アイソクラティック溶出が移動相の濃度を一定に保つのに対し、グラジエント溶出は移動相の濃度を変化させることである。

等比級数溶出法では、ピーク幅は保持時間に対して直線的に増加します。しかし、グラジエント溶出法では、溶出後のフラクションの保持力が低下するため、溶出速度が速くなり、ピーク幅が狭くなる。さらに、アイソクラティック溶出では、選択性がカラムサイズに依存しないのに対し、グラジエント溶出では、選択性がカラムサイズに依存して変化することも特徴である。

下表は、アイソクラティック溶出とグラジエント溶出の違いをまとめたものです。

概要 - アイソクラティック vs. グラディエント溶出

アイソクラティック溶出とグラジエント溶出は、移動相の性質を表しています。アイソクラティック溶出とグラジエント溶出の大きな違いは、アイソクラティック溶出が移動相の濃度を一定に保つのに対し、グラジエント溶出は移動相の濃度を変化させながら溶出することである。

引用

1 "グラディエント溶出"