寒天培地法とディスク拡散法の大きな違いは、寒天培地法が寒天培地に開けた井戸や穴に抽出液を注入するのに対し、寒天拡散法は検液を含んだろ紙ディスクを寒天の表面に置くという点である。

微生物は多くの病気の病原体である。微生物を殺したり、増殖を抑えたりする抗菌剤には様々なものがあります。抗菌活性の検出には、いくつかのスクリーニングや評価方法があります。そのひとつが寒天培地拡散法、寒天円板拡散法であり、これらはin vitro解析で一般的に用いられている方法、すなわち寒天拡散法である。これらの方法は、指定された装置を必要とせず、さらに再現性や標準化の評価も不要なため、広く利用されています。どちらの方法も、寒天培地中での抗菌剤の拡散を利用したものである。

カタログ

1. 概要と主な相違点 2. 寒天拡散とは 3. 寒天拡散とは 4. 寒天セルとディスク拡散の類似点 5. 並べて比較 - 寒天セルとペーパー拡散 6. まとめ

寒天培地拡散法は何ですか？

寒天拡散法は、試験管内抗菌活性を検出するための最も安価で簡単な方法の一つである。この方法を用いて、植物抽出物および微生物抽出物の病原性微生物に対する抗菌活性をスクリーニングすることができる。この方法では、病原性細菌を拡散板法を用いて寒天培地にv接種する。これは、ガラス製スプレッダーを用いて、既知量の微生物溶液を寒天表面に塗布することによって行われる。その後、無菌コルクで穴またはウェル（直径6～8mm）を無菌的に開ける**。次のステップでは、抽出液（試験液）を試験管に充填し、シャーレを適切な温度と条件でインキュベートします。培養中、抗菌エキス溶液は寒天培地中に徐々に拡散し、試験対象菌の増殖を抑制する。最後に、阻害帯を観察することができ、その直径を測定値として使用します。

寒天平板拡散法は何ですか？

寒天拡散法と同様に、寒天ディスク拡散法もまた、実験室で抗菌薬感受性試験によく使用される方法である。この方法では、寒天培地上に試験溶液を含んだろ紙ディスクを保持する。これに先立ち、寒天平板に試験微生物を接種しておく必要がある。次に、既知濃度の抽出物を含むろ紙ディスクを寒天培地上に置く。その後、適切な条件下でインキュベートされます。

図02：寒天培地拡散法

培養後、阻害域の直径を測定し、比較した。

寒天培地とディスクディフュージョン法の共通点

• 薬剤感受性試験でよく用いられる方法として、寒天プール法と紙面拡散法、すなわち寒天拡散法がある。
• いずれの方式も導入が容易で、費用対効果も高い。
• 通常、実験室で実施される。
• そのため、インビトロ
• この2つの方法を用いることで、複数の微生物や複数の抽出物を容易に検出することができる。
• また、2つの方法の結果の解釈もシンプルです。
• また、特定の機器を必要としない。
• しかし、いずれの方法も殺菌作用と抗菌作用を区別することはできない。
• また、いずれの方法も最小阻害濃度の測定には適していない。

寒天培地とディスクディフュージョン法の違い

寒天ウェル拡散法は、寒天培地に穴を開け、抽出物を添加する方法である。一方、寒天平板拡散法は、既知濃度の抽出物を含むろ紙ディスクを寒天培地上に置いて行う抗菌活性試験である。これが寒天細胞法とディスク拡散法の決定的な違いなんですね。このように、寒天プール拡散法では寒天孔または寒天ウェルに抽出物を添加するのに対し、寒天拡散法ではろ紙ディスクに抽出物を添加する。このように、寒天ウェル拡散法では濾紙ディスクを使用せず、寒天ディスク拡散法では寒天培地中に寒天ウェルが生成されない。

寒天拡散法は、側面拡散法と異なる点がある。

概要 - 寒天培地 vs. ディスクディフュージョン法

抗菌薬感受性試験法には、寒天培地法とディスク拡散法があります。いずれの方法も、簡便で安価な体外培養法です。寒天法では、培地にウェルや孔を形成し、そこに抽出物を加えて抗菌活性を評価する。一方、寒天平板拡散法では、ろ紙ディスクに抽出物を添加し、寒天の表面に置く。この点が、寒天培地法とディスク拡散法の大きな違いである。

引用

1Balouiri, Mounyr et al."Methods for in vitro antimicrobial activity assessment: a review"、Journal of Pharmaceutical Analysis, Elsevier, 2 December 2015, available here.