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多くの研究では動物細胞の培養が行われるため、これらの研究では動物細胞株を特定の増殖条件下で維持することが必要となります。動物細胞培養は、薬理学的研究、疾病診断、癌研究などに広く利用されている。動物細胞の培養には、細胞培養液が重要なポイントになります。動物細胞の培養には、DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)とRPMI(Roswell Park Memorial Institute Medium)が使用されています。 RPMIは哺乳類細胞の浮遊培養に広く用いられている培地で、DMEMはアミノ酸とビタミン濃度を4倍にした基礎培地を改良したものです。 DMEMは細胞の接着培養に使用されています。この2つの培地の大きな違いは、培地の培養の種類です。 RPMIは浮遊培養に、DMEMは付着細胞の培養に使用されます。
1. 概要と主な相違点 2. RPMIとは 3. DMEMとは 4. RPMIとDMEMの類似点 5. 並べて比較 - RPMIとDMEMの表形式 6. まとめ
RPMIまたはRoswell Park Memorial Institute Mediumは、RPMI 1640とも呼ばれます。培地の名前は、この培地が発見された研究所に由来しています。動物細胞培養、特に哺乳類細胞の増殖によく使用される培地です。元々はヒトのリンパ球の培養に使われていたものです。
RPMIには以下の成分が含まれています。
RPMIは、培地中のリン酸塩の濃度が高いことが特徴です。 RPMIは、5%CO2環境で使用されます。これにより、細胞の成長に最大かつ最適な条件を提供することができます。培地のpHは重炭酸バッファーシステムにより8.0に維持される。
図01:培養皿の上の細胞
ダルベッコ変法イーグル培地(DMEM)は、市販の変法培地です。中粉の本来の質感は黄色です。DMEMでは、ビタミン濃度を元の4倍まで高め、培地の栄養価を高めています。
DMEMはさらに塩類(硝酸鉄、ピルビン酸ナトリウムなど)や非必須アミノ酸(セリン、グリシンなど)の添加により改良されています。また、培地中のグルコースの配合も変更しました。DMEMも完全な培地ではないので、血清培地を補充する必要があります。通常、DMEMにはウシ胎児血清(FBS)が添加されており、培養に必要なタンパク質や成長因子を供給します。
炭酸水素ナトリウムの添加により、培地のpHが変化する。炭酸水素ナトリウム添加前の培地のpHは6.80〜7.40、炭酸水素ナトリウム添加後の培地のpHは7.60〜8.20の範囲であった。培地は2~8℃の温度で保存されます。
図02:DMEM
RPMIおよびDMEM | |
RPMIは、哺乳類細胞の浮遊培養に広く使用されている培地です。 | DMEMは、アミノ酸やビタミンの濃度を高めて改良した基礎培地です。 |
追加のリン酸塩の存在 | |
RPMIに存在する。 | DMEMには存在しない。 |
使用方法 | |
ヒトTリンパ球、Bリンパ球、骨髄細胞、ハイブリドーマ。 ヒト腫瘍細胞の研究に使用される。 | 細胞のアポーズド・カルチャーの培養に。ポリオーマウイルスがマウス胚にプラーク細胞を形成する能力を研究した。接触阻害を研究した。ニワトリ胚の細胞培養の解析の検討 |
文化の種類 | |
懸濁培養にはRPMIが使用されます。 | DMEMは、細胞接着培養に使用されます。 |
RPMI、DMEMともに動物細胞培養、特にリンパ球を含む動物細胞株のin vitro培養に広く用いられています。 DMEMは栄養濃度を高めた改良型基礎培地です。 RPMIもロスウェルパーク記念研究所が開発した動物細胞培養、特に哺乳類リンパ球の培養に使用される培地です。どちらのメディアも市販されています。これがRPMIとDMEMの違いです。
1. "RPMI Medium - RPMI-1640 Medium", Sigma Aldrich. こちら 2. "Dulbecco's Modified Eagle's Medium - Dimethyl Ether", Sigma Aldrich.ジメチルエーテル"Sigma Aldrich社製。ここでは、2. "ダルベッコ培地改良ホークス用-ジメチルエーテル , ジメチルエーテル" を紹介します。Sigma Aldrich社製。