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細胞株とは、特殊な条件下で増殖・成長することができる永続的な細胞培養物のことである。がん細胞株、肝細胞株、骨髄細胞株など、研究用に細胞株として維持されているものがあります。細胞株は初代培養から調製され、大きく分けて壁細胞培養と浮遊細胞培養の2種類があります。そのため、これらの培養から得られる細胞株は、Apposed Cell LineやSuspension Cell Lineと呼ばれている。Apposed Cell Lineとは、初代培養物が固体担体に接着している細胞株であり、そのためアンカレッジ依存性の細胞である。浮遊細胞株とは、培養液を液体培地に懸濁させ、細胞を液体培地内に保持した細胞株である。アンカレジには依存しない。有壁細胞株と浮遊細胞株の主な違いは、細胞の定着依存性である。壁在性細胞株は増殖のために強固な支持体を必要とし、したがって固定に依存するが、浮遊性細胞株は固定に依存せず、増殖のために強固な支持体を必要としない。
1. 概要と主な相違点 2. アポーズドセルラインとは 3. サスペンションセルラインとは 4. アポーズドセルラインとサスペンションセルラインの類似点 5. 並べて比較 - アポーズドセルラインとサスペンションセルラインの表形式 6. まとめ
付着性細胞株は、アンカレッジ依存性細胞株である。そのため、これらの細胞株の増殖には、安定した支持体が必要です。抽出された脊椎動物の細胞(造血系細胞を除く)の多くは、アンカー依存性である。そのため、ほとんどの脊椎動物の細胞は、安定した細胞増殖が可能な接着剤で培養されている。
アプレス細胞株の多くは、組織培養処理された血管で樹立され、その増殖は血管またはアプレス壁の領域に限定される。アプレス細胞株培養のために細胞を処理する場合、トリプシンによって細胞を分離し、その後、反復継代法を用いてアプレス細胞株を樹立する必要があります。細胞学や細胞遺伝学では、通常、Apposed Cell Lineが使用されます。また、研究目的にも使用されます。
サスペンションセルラインはアンカリングとは関係ない。懸濁液に由来するものであり、懸濁液の液体培地で容易に培養することができる。浮遊細胞培養は、その成長を維持するために継続的に攪拌する必要があります。ヒト造血細胞は主に浮遊培養されるため、研究目的で使用する場合は浮遊細胞株として維持されます。
浮遊細胞株の維持には、常に攪拌が必要であり、継代作業はほとんど必要ない。浮遊細胞の増殖は、培地中の細胞の濃度によって制限されます。その結果、成長因子や培地成分が時間の経過とともに枯渇し、細胞の成長が制限されます。
図01:緑膿菌の懸濁培養液
浮遊細胞株は、商業生産において最も広く使用されている一次細胞株である。ほとんどの微生物細胞は浮遊細胞として維持され、抗生物質、ビタミン、アミノ酸、タンパク質などの有用な二次代謝産物を抽出するために使用されています。サスペンション細胞株は、有壁細胞株に比べて培養中にはるかに高い生産物を生み出し、有壁細胞株に比べて労働効率とコスト効率が高い。
壁付き細胞株および浮遊細胞株 | |
壁在性細胞株は、初代培養物が固体担体に付着している細胞株である。 | 浮遊細胞株とは、培養液を液体培地に懸濁させることで、細胞を液体培地内に保持した細胞株である。 |
アンカレジ依存症 | |
付着細胞系は、アンカレッジ依存性である。 | サスペンションセルラインはアンカリングとは無縁です。 |
扇動 | |
付着性の細胞株は攪拌を必要としない。 | 懸濁された細胞株は攪拌が必要です。 |
トリプシン化 | |
トリプシン化は、付着性細胞株で存在する。 | 浮遊細胞株におけるトリプシンの欠乏。 |
組織培養処理した血管 | |
細胞接着した細胞株で必要。 | 浮遊細胞株には必要ありません。 |
させる | |
付着性の細胞株は収量が低くなる。 | 懸濁液の細胞株は収量を上げることができる。 |
動物細胞培養や植物組織培養において、細胞株の維持は重要なプロセスである。また、工業プロセスで広く利用されている微生物細胞についても、細胞株を維持しています。細胞株は、壁付き細胞株と浮遊細胞株と呼ばれることがある。壁在性細胞株は、壁在性でアンカーに依存する初代培養細胞から得られたものです。浮遊細胞株は、浮遊初代細胞培養から派生したものです。これらの細胞は流動的な培地中に存在し、細胞の増殖には常に攪拌が必要です。これが、壁付き細胞株と浮遊細胞株の違いである。
1. "Adherent cell culture vs. suspension cell culture", Thermo Fisher Scientific.ここでは2つを紹介します。Lonza、プライマリーセル&セルライン。以下、2.ロンザ、プライマリーセル&セルライン