MTT法与MTS法的主要区别在于,MTT法有一个额外的步骤与formazan晶体的增溶有关,而MTS法与formazan晶体的增溶无关。
MTT法和MTS法是两种用于体外细胞活性测定的方法。它们有助于揭示测试分子对细胞增殖和细胞毒性的影响,从而影响细胞活力。此外,MTT法比MTS法费时。
1.什么是MTT分析-定义、过程、重要性2。什么是MTS分析-定义、过程、重要性3。MTT法和MTS法有何相似之处?共同特征概述4。MTT法和MTS法的区别是什么?关键区别的比较
细胞增殖,细胞活力,细胞毒性,MTS法,MTT法
MTT法是第一种适用于高通量筛选(HTS)的96孔均一细胞活力测定法。本试验的原理是根据细胞通过酶(NAD(P)H依赖性细胞氧化还原酶)的作用还原四氮唑染料的能力来确定细胞活力,该酶存在于活细胞中。这里,用于MTT分析的四唑类染料是3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化铵,其颜色为黄色。上述酶作用导致在细胞内、细胞表面附近和培养基中以晶体形式沉淀的不溶性甲赞产物的形成。然而,由于福尔马赞产品的数量是通过测量吸光度来测量的,因此必须先溶解不溶性晶体,然后在570 nm处测量吸光度。
Figure 1: MTT Reaction
然而,MTT法虽然所用材料少,步骤少,但也存在一些缺点。该方法不适用于悬浮细胞。此外,样品中沉淀的蛋白质和细胞碎片会干扰吸光度测量,降低灵敏度和分析的准确性。此外,必须针对每种细胞类型优化分析时间和样品中存在的细胞数量。
MTS法是一种新的MTT法,它使用了一种新型的四氮唑染料,最终得到水溶性的甲赞产物。这里,MTS分析中使用的四氮唑染料是3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H四氮唑。可溶甲赞染料的形成发生在吩嗪甲硫酸盐(PMS)的存在下,PMS作为中间电子受体,从NADH转移电子以还原四氮唑染料,形成可溶甲赞产物。
Figure 2: MTT Plate
直接形成可溶的福尔马赞产物可减少MTT分析中福尔马赞产物的溶解步骤。因此,MTS分析更高效、更省时。此外,它还消除了潜在的错误,如细胞丢失,这可能发生在删除培养基和溶解福尔马赞产品。另外,得到的福尔马赞产物颜色较深;这提高了分析的灵敏度和准确性。
MTT法是指用于评估细胞代谢活性的比色法,MTS法是指一步MTT法,它提供了在不需要MTT法要求的间歇步骤的情况下直接将试剂直接添加到细胞培养中的方便。因此,MTT法与MTS法的主要区别在于此。
此外,MTT试验使用MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化铵),MTS试验使用MTS(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H四唑)。
此外,MTT试验中的甲赞产物是不溶性的,而MTS试验中的甲赞产物是可溶性的。因此,这是MTT法和MTS法的一个重要区别。
此外,MTT法在570nm处测定吸光度,而在490nm处测定吸光度。
MTT法与MTS法测定时间也有差异。MTS法比MTT法耗时少。
此外,MTT法灵敏度和准确度较低,因为细胞碎片和沉淀蛋白会干扰吸光度测量,而MTS法由于形成较暗的formazan产物而更敏感和准确。
MTT法和MTS法的另一个区别是成本。MTT法比MTS法便宜。
MTT法是一种经典的检测细胞活性的方法,可以用来评价受试分子对细胞增殖和细胞毒性的影响。然而,在MTT试验中得到的福尔马赞产物是不溶性的;因此,该分析需要额外的步骤来溶解福尔马赞产品。相比之下,MTS法是一种测定细胞活力的新方法,它使用了一种新的四氮唑盐,它能产生可溶的甲赞,减少了MTT法的一个步骤。因此,MTS法比MTT法更有效。因此,MTT法和MTS法的主要区别在于甲赞产品的特性。
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