基因组dna(genomic dna)和质粒dna分离(plasmid dna isolation)的区别

基因组DNA分离与质粒DNA分离的主要区别在于,基因组DNA分离采用强裂解(包括细胞膜的酶或机械分解)将基因组DNA释放到溶液中,而质粒DNA分离采用弱碱裂解将质粒DNA与基因组DNA一起释放到溶液中。此外,在基因组DNA分离中,细胞裂解后可从脂膜和蛋白质中纯化基因组DNA,而在质粒DNA分离中,用醋酸钾中和可将质粒DNA与基因组DNA分离。...

基因组DNA分离与质粒DNA分离的主要区别在于,基因组DNA分离采用强裂解(包括细胞膜的酶或机械分解)将基因组DNA释放到溶液中,而质粒DNA分离采用弱碱裂解将质粒DNA与基因组DNA一起释放到溶液中。此外,在基因组DNA分离中,细胞裂解后可从脂膜和蛋白质中纯化基因组DNA,而在质粒DNA分离中,用醋酸钾中和可将质粒DNA与基因组DNA分离。

基因组DNA和质粒DNA分离是DNA分离的两种重要提取方法,在生物技术中有着广泛的应用。

覆盖的关键领域

1.什么是基因组DNA分离-定义、过程、重要性2。什么是质粒DNA分离-定义,过程,重要性3。基因组DNA和质粒DNA分离之间有什么相似之处——共同特征概述4。基因组DNA和质粒DNA分离的区别是什么?关键区别的比较

关键术语

细胞裂解、基因组DNA分离、质粒DNA分离

基因组dna(genomic dna)和质粒dna分离(pla**id dna isolation)的区别

什么是基因组dna分离(genomic dna isolation)?

基因组DNA分离是从细胞中提取基因组DNA的过程。基因组DNA分离的一个主要特点是需要一个强有力的裂解步骤才能将基因组DNA释放到溶液中。一般来说,细胞壁可以被溶菌酶和蛋白酶K酶分解。相比之下,细胞壁的机械破坏是更普遍的过程所做的珠打击的漩涡。在细胞裂解之后,通过酚-氯仿萃取或其他方法纯化DNA对于清除脂质双层、蛋白质和其他细胞碎片是必不可少的。

Difference Between Genomic DNA and Pla**id DNA Isolation

Figure 1: Genomic DNA Isolation

此外,基因组DNA的降解是基因组DNA分离过程中的主要缺陷之一。因此,在提取过程中必须保持低温或使用化学抑制剂来防止dna酶的活性,同时防止染色体断裂。

什么是质粒dna分离(pla**id dna isolation)?

质粒DNA分离是从细胞中提取质粒DNA的过程。它还使质粒DNA远离这些细胞的基因组DNA。然而,质粒DNA分离的关键之一是进行温和的细胞裂解过程,如碱性裂解。碱解缓冲液基本上含有氢氧化钠和十二烷基硫酸钠,使质粒DNA和基因组DNA完全变性。然而,必须防止过度变性,这可能会不可逆地变性质粒DNA。

Genomic DNA vs Pla**id DNA Isolation

Figure 2: Pla**id DNA Isolation 

细胞裂解后的步骤是质粒DNA分离中的中和。一般来说,醋酸钾是中和剂。由于质粒DNA与基因组DNA相比体积小,容易发生复性,而基因组DNA容易缠结。在那之后,离心可以形成一个含有基因组DNA的小球与蛋白质结合。因此,质粒DNA保留在上清液中。最终,这个质粒DNA可以用乙醇沉淀。

基因组dna与质粒dna分离的相似性

  • 这是两种用于生物技术的DNA提取方法。
  • 两种DNA分离的两个主要步骤是细胞裂解和DNA纯化。

基因组dna(genomic dna)和质粒dna分离(pla**id dna isolation)的区别

定义

基因组DNA分离是指从生物样品中分离DNA的技术,而质粒DNA分离是指从生物样品中分离质粒DNA。

样品

基因组DNA可以从不同的生物样品中分离,而质粒DNA的分离主要是从细菌或真菌的细胞培养物中分离。

细胞裂解

此外,细胞裂解是基因组DNA与质粒DNA分离的主要区别。基因组DNA分离使用强裂解,包括酶或机械破坏细胞膜,将基因组DNA释放到溶液中,而质粒DNA分离使用弱碱裂解将质粒DNA与基因组DNA一起释放到溶液中。

变性

此外,用于基因组DNA分离的细胞裂解缓冲液的pH为7-9,不变性DNA,而用于质粒DNA分离的细胞裂解缓冲液的pH为12.1-12.3,同时变性质粒DNA和基因组DNA。

第二步

另外,细胞裂解后,可以从脂膜和蛋白质中纯化基因组DNA,而在质粒DNA分离中,第二步是用醋酸钾中和,将质粒DNA与基因组DNA分离。

离心过程中

在离心过程中,基因组DNA出现在颗粒中,而质粒DNA出现在上清液中。

意义

另外,基因组DNA分离是一种非常简单的方法,而质粒DNA分离是一种更敏感的方法。

下游应用程序

基因组DNA分离的下游应用可以是PCR或测序,质粒DNA分离的下游应用可以是克隆转染或基因治疗。

结论

基因组DNA分离是从不同类型的生物样品中提取DNA的一种方法。一般来说,这是一种更直接的方法,包括细胞膜的剧烈分解,然后从脂质双层、蛋白质和其他细胞碎片中纯化基因组DNA。另一方面,质粒DNA分离是一种更为敏感的方法,它利用弱碱性裂解来破坏细胞膜。此外,它还包含一个中和步骤来分离质粒DNA和基因组DNA。最后,质粒DNA出现在上清液中。因此,基因组DNA与质粒DNA分离的主要区别在于DNA的裂解和纯化方法。

References:

1.苏珊·肯尼迪。”质粒与基因组DNA提取:区别〉,Bitesize Bio,2019年6月20日,可在这里获得。

  • 发表于 2021-07-02 02:04
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  • 分类:科学

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