正常相位(normal phase)和反相色谱法(reverse phase chromatography)的区别

正相色谱和反相色谱的主要区别在于正相色谱有极性固定相和非极性流动相，而反相色谱有非极性固定相和极性流动相。此外，正相色谱的固定相主要是纯二氧化硅，流动相是氯仿等非水溶剂，而反相色谱的固定相是具有长疏水性长链的改性二氧化硅基质，流动相主要是水、甲醇或乙腈。...

正相色谱和反相色谱的主要区别在于正相色谱有极性固定相和非极性流动相，而反相色谱有非极性固定相和极性流动相。此外，正相色谱的固定相主要是纯二氧化硅，流动相是氯仿等非水溶剂，而反相色谱的固定相是具有长疏水性长链的改性二氧化硅基质，流动相主要是水、甲醇或乙腈。

正相色谱法和反相色谱法是两种在高压下操作的高效液相色谱法。通常，与常规液相色谱法相比，它们具有更高的分辨率。

覆盖的关键领域

1.什么是正相色谱法-定义、过程、重要性2。什么是反相色谱-定义，过程，重要性3。正相色谱法和反相色谱法有什么相似之处？共同特征概述4。正相色谱法和反相色谱法的区别是什么？关键区别的比较

关键术语

高效液相色谱法，液相色谱法，流动相，正相色谱法，反相色谱法，固定相

什么是正相色谱法(normal phase chromatography)？

正相色谱法是一种高效液相色谱技术。它根据与吸收剂（即极性二氧化硅）的相互作用程度分离分析物。因此，这种色谱的固定相是亲水的。它还可以与样品混合物中的亲水分子发生亲水性相互作用。通常，这些相互作用包括氢键、偶极-偶极相互作用等。因此，更多的非极性分析物在固定相中停留的时间更长，从而增加保留时间。

Figure 1: Normal Phase and Reverse Phase Chromatography – Properties

此外，正相色谱中的流动相是非极性和非水性的。因此，混合物中的非极性或疏水性分析物在过程开始时用流动相有效地洗掉。同时，分析物的保留时间随着流动相极性的增加而缩短。此外，保留时间的重现性差是正相色谱法的主要缺点。基本上，这是由于二氧化硅表面存在一层水或质子有机溶剂。然而，这在反相色谱中被消除。

什么是反相色谱法(reverse phase chromatography)？

反相色谱法是近年来发展起来的一种高效液相色谱法。与正相色谱法相比，它具有更高的保留时间重现性。基本上，这种再现性的增加是通过使固定相非极性来实现的。为此，将二氧化硅固定相的表面改性为RMe2SiCl，其中R是直链烷基，例如C18H37或C8H17。然而，由于固定相的非极性，样品混合物中极性较低的分析物与正相色谱法相比往往具有较高的保留时间。

Figure 2: Reverse Phase Chromatography – Elution

此外，可以通过向流动相中添加更多的水来增加保留时间，从而增加非极性分析物与固定相之间的疏水相互作用。此外，反相色谱的流动相是极性的，洗掉样品混合物中的极性分析物。这有助于分离样品混合物中的非极性分析物。此外，流动相的表面张力和pH值对保留时间也有影响。

正相色谱法和反相色谱法的相似性

正、反相色谱法 HPLC有两种色谱技术。
他们的仪器示意图包括 A. 除气器，采样器、泵和探测器。
两者都在高压下工作。
此外，它们的典型柱尺寸是直径2.1–4.6 mm，长度30–250 mm。
两者都分离出一小部分样品。
分离是基于不同的样品组分与吸附剂颗粒的相互作用程度。这些相互作用取决于温度。
较小的吸附剂颗粒（2–50μM 平均粒径）这两种色谱法都有很高的分辨率。
此外，两种类型的色谱法都给出了样品组分的定量分析。
每个样品大约需要2-60分钟但是，不允许并行分析。
色谱的保留时间可以通过增加分子间的相互作用来增加柱上的分析物。
分析物可以通过使流动相的极性与固定相的极性更为相似阶段。

正常相位(normal phase)和反相色谱法(reverse phase chromatography)的区别

定义

正相色谱法是指一种分离方法，它允许混合物的组分分布在两个相之间，其中一个是极性固定相，而流动相是非极性的。相反，反相色谱指的是流动相比固定相更为极性的分离方法。

进化

正相色谱法是在20世纪70年代发展起来的液相色谱法。但是，反相色谱法是最近发展起来的一种高效液相色谱法。

固定相

此外，正相色谱使用极性固定相（主要是纯二氧化硅），而反相色谱使用非极性固定相（具有长疏水长链的改性二氧化硅基质）。

流动相

正相色谱使用非极性非水溶剂作为流动相，主要是氯仿，而反相色谱使用极性流动相，主要是水、甲醇或乙腈。

分离类型

此外，正相色谱分离柱中保留时间长的极性分析物，而反相色谱分离柱中保留时间长的极性分析物。

流动相分析物

在正相色谱中，流动相在分离开始时携带非极性分析物，而在反相色谱中，流动相携带极性分析物。

增加保留时间

非极性流动相增加了正相色谱的保留时间，而极性流动相增加了反相色谱的保留时间。

洗脱

在正相色谱中可通过增加流动相的极性来洗脱分析物，而在反相色谱中可通过降低流动相的极性来洗脱分析物。

固定相特性

正相色谱的固定相含有一层水或质子有机溶剂，而反相色谱的固定相不含有水或质子溶剂。

保留时间的再现性

此外，正相色谱保留时间的重现性较差，而反相色谱保留时间的重现性较高。

立柱损坏

正相色谱柱易损坏，反相色谱柱不易损坏。

结论

正相色谱法是一种使用极性固定相和非极性流动相的高效液相色谱法。因此，混合物的非极性分析物很容易移出色谱柱，同时允许根据与固定相吸收剂的相互作用程度分离极性分析物。另一方面，反相色谱法是一种新型高效液相色谱法，它使用非极性固定相和极性流动相。因此，极性分析物随流动相移出色谱柱，允许根据与固定相的相互作用程度分离非极性分析物。因此，正相色谱法和反相色谱法的主要区别在于固定相和流动相的类型。