FPLC与HPLC的主要区别在于FPLC是一种纯化蛋白质、核苷酸、多肽等大分子生物大分子的液相色谱法,而HPLC是一种分离小分子化合物的液相色谱法。
液相色谱法是一种将样品分离成不同组分的技术。这种分离是由于特定样品与流动相和固定相的相互作用而发生的。在液相色谱法中,样品中的组分根据各组分对流动相的亲和力进行分离。当流动相和样品通过色谱柱时,样品组分开始分离成能被紫外-可见光谱检测到的条带。因此,FPLC和HPLC是两种液相色谱技术。
1. 概述和主要区别 2. 什么是FPLC 3. 什么是高效液相色谱法 4. 相似性–FPLC和HPLC 5. FPLC与HPLC的表格形式 6. 总结-FPLC与HPLC
FPLC是一种纯化蛋白质、核苷酸和肽等生物大分子的液相色谱法。快速蛋白质液相色谱法(FPLC)于1982年由Pharmacia公司在瑞典首次开发和上市,常用于蛋白质混合物的分析和纯化。这是基于移动流体(流动相)和多孔固体材料(固定相)的样品组分亲和力原理进行的。在FPLC中,流动相是缓冲液,固定相是由微珠组成的树脂。它通常由交联琼脂糖包装成圆柱形玻璃或塑料柱。
图01:FLPC(快速蛋白质液相色谱)仪器
在大多数FLPC策略中,都使用了离子交换树脂。因此,感兴趣的蛋白质将通过电荷相互作用与树脂结合。FLPC技术也使用两种缓冲液:缓冲液1(运行缓冲液)和缓冲液2(洗脱缓冲液)。最初,当缓冲液和样品混合物流经色谱柱时,混合物中的目标蛋白质将通过电荷相互作用与树脂结合。但是当洗脱缓冲液在过程结束时穿过柱时,所需的蛋白质被解离并返回到洗脱缓冲液中的溶液中。随后,溶液(含有感兴趣的蛋白质的洗脱液)通过两个检测器,这两个检测器测量盐浓度和蛋白质浓度。当每种蛋白质被洗脱时,它在检测过程中显示为一个“峰”,可以收集起来供进一步使用。
HPLC是一种分离小分子化合物的液相色谱法。1969年,美国沃特斯公司(Waters Corporation)在商业上**了第一种高效液相色谱法(HPLC)。在高效液相色谱法(HPLC)中,溶剂(流动相)中的样品混合物(分析物)在高压下通过色谱填料(固定相)柱。样品混合物由移动的氦气或氮气载气流携带。
图02:HPLC(高效液相色谱法)
样品混合物中与固定相相互作用量最小或与流动相相互作用量最大的组分将更快地离开色谱柱。另一方面,样品混合物中与固定相的相互作用量最大或与流动相的相互作用量最小的组分离开色谱柱的速度较慢。根据上述相互作用原理,样品混合物的组分可以被分离。此外,仪器检测器识别出离开色谱柱的样品混合物的每种成分。高效液相色谱法用于检测环境和生物样品中是否存在已知化合物,如药物、毒素或杀虫剂。它被用于不同的行业,如制药,环境,法医和化学品。
FPLC是一种用于纯化蛋白质、核苷酸和肽等生物大分子的液相色谱法。HPLC是一种用于分离小分子化合物的液相色谱法。所以,这是FPLC和HPLC的关键区别。此外,FPLC使用pH和电导率监测仪以及馏分收集器。相反,高效液相色谱法不使用pH值和电导率监测器以及组分收集器。
下面的信息图表以表格形式列出了FPLC和HPLC之间的更多差异。
色谱法是一种实验室分析技术,用于从混合物中分离成分。液相色谱技术分为柱色谱法、气相色谱法、液相色谱法、离子交换色谱法等。FPLC是一种用于纯化蛋白质、核苷酸和肽等生物大分子的液相色谱法。另一方面,HPLC是一种用于分离小分子化合物的液相色谱法。因此,本文总结了FPLC和HPLC的区别。
1.“快速蛋白质液相色谱法”,新闻医疗网,2019年1月25日什么是HPLC/高效液相色谱?“实验室培训,2021年5月11日。 2. “
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