内毒素是一种常见的药品污染物,来源于细菌。内毒素的存在可能来自制造过程的固有成分或产品的意外污染。内毒素可引起内毒素或败血症性休克、组织损伤甚至死亡。因此,在批准药物释放前清除内毒素是必要的,以避免给药物的接受者造成疾病。
当生产过程中存在或曾经存在一组称为革兰氏阴性菌的细菌时,就会发生内毒素污染。细菌一般分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌两类,革兰氏阴性菌极为常见。革兰氏阴性菌的名称来源于细菌在被称为革兰氏染色的特定染色过程后的外观。内毒素存在于所有革兰氏阴性细菌中,无论它们是否引起疾病。。
革兰氏阴性细菌的外部含有脂多糖(LPS),用于结构稳定性。内毒素是指细菌的LPS部分。例如,一个大肠杆菌细胞含有大约200万个LPS分子。LPS不仅存在于活细菌或死细菌的细胞中,而且还不断释放到环境中。释放发生在细菌生长和分裂期间以及细胞死亡时。
LPS分子对身体有间接的有害作用。内毒素通过与血液中称为巨噬细胞和单核细胞的细胞结合而与免疫系统相互作用。这种结合通过释放白细胞介素-6、白细胞介素-1和肿瘤坏死因子等因子引起炎症反应。这种炎症反应会导致发热,有时还会导致内毒素休克和死亡。
这些危险效应要么是单次高剂量内毒素,要么是反复低水平暴露。每毫升产品1纳克LPS的剂量在哺乳动物静脉注射该产品时会引起内毒素反应。患有艾滋病、白血病或糖尿病等疾病的人尤其容易发生内毒素休克。
基因工程革兰氏阴性菌通常用于生产生物活性蛋白质和肽。生产细胞和周围培养物中都存在LPS分子,这意味着产品需要纯化和去除内毒素。与蛋白质相比,脂多糖是一种非常稳定的分子,能够抵抗极端的pH值和温度,因此去除内毒素需要复杂的去除技术。因此,制造商使用离子交换色谱法、超滤法和膜色谱法等方法去除或降低内毒素至可接受水平。。
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