什么是一个共焦显微镜?(a confocal microscope?)

共焦显微镜是一种特殊的荧光显微镜,用于获得高质量的二维和三维图像。在基本的(宽视场)荧光显微镜下,特定波长的光照在一个标本上,标本吸收部分光,并以较长的波长反射其余的光。较长波长的光通过一个分色镜,它允许较长波长的光,但不允许原始(较短)波长的光通过。观察样品的人只看到通过分色镜的光。基本的荧光显微镜同时捕捉焦点内和焦点外的光,这对于不需要非常高的分辨率的大型标本来说效果很好。但对于观察精细的细节...

共焦显微镜是一种特殊的荧光显微镜,用于获得高质量的二维和三维图像。在基本的(宽视场)荧光显微镜下,特定波长的光照在一个标本上,标本吸收部分光,并以较长的波长反射其余的光。较长波长的光通过一个分色镜,它允许较长波长的光,但不允许原始(较短)波长的光通过。观察样品的人只看到通过分色镜的光。基本的荧光显微镜同时捕捉焦点内和焦点外的光,这对于不需要非常高的分辨率的大型标本来说效果很好。但对于观察精细的细节,它的效果就不那么好了。需要一个共焦显微镜来捕捉高分辨率的荧光图像。

共焦显微镜使用一个针孔来拒绝失焦的光线。光线不是只通过分色镜,而是同时通过分色镜和针孔,这意味着观看样品的人只看到样品的一个点。为了查看整个样品,可移动的镜子扫描样品的一个矩形平面,计算机在扫描样品时收集发射的光。一次完整的扫描将产生试样的光学切片,或横断面。这种类型的显微镜被称为共焦激光扫描显微镜,部分原因是激光被用作光源。

为了创建一个三维图像,需要进行多次扫描,创建标本的几个 "切片",然后计算机将每个切片结合起来,创建一个三维图像。显微镜可以通过编程来改变切片之间的空间,这取决于用户想要获得多么清晰的三维图像。显微镜还可以改变其扫描图像的速度,慢速扫描比快速扫描的分辨率更高。

共焦显微镜已经成为许多生命科学实验室中非常常用的设备。它们很昂贵,而且有些大,往往有专门的房间供其使用,因为房间需要黑暗,以获得良好的荧光图像。尽管共焦显微镜最常被用来观察细胞和细胞内的结构,但它们可以用来获得任何三维荧光标本的图像,有时也被用来观察半导体材料。

  • 发表于 2022-02-09 17:54
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  • 分类:科学

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