电泳与电渗
物理分离方法如过滤、蒸馏、柱层析等在分离某些分子时并不容易。电泳和电渗是另外两种可以用来分离带电粒子的分离技术。
什么是电泳?
电泳是一种根据分子大小来分离分子的技术。这种分离的基础是分子的电荷和它们在电场中运动的能力。这是分子生物学中最常见和最主要的分离分子,特别是DNA和蛋白质的技术。这主要是因为它相对容易和便宜。电泳设备可能有点复杂,准备它需要一些时间。但是我们可以很容易地用实验室里的东西做电泳仪。电泳技术可以根据我们的目的而变化。我们可以用一维电泳来分离DNA或蛋白质。当需要更多分辨率的样品时(如指纹印刷),使用二维电泳。凝胶被用作分离分子的支撑介质。这种凝胶可以制成平板或试管。这个过程的基本原理是,当外加电场时,根据分子在凝胶中的运动速率来分离分子。在这个电场中,像DNA这样带负电的分子倾向于向正极移动,而带正电的分子则倾向于向负极移动。电泳用的凝胶有两种:琼脂糖和聚丙烯酰胺。这两个有不同的解决能力。这种凝胶就像筛子一样过滤不同大小的分子。凝胶中的静电电荷起到了作用力的作用。
分离取决于离子的流动性。
F=fv=ZeE
V=零/英尺
F=作用在粒子上的力
f=摩擦系数
V=平均迁移速度
Z=迁移粒子的电荷
e=基本电荷
E=电场强度
电泳的必要条件相对简单。当**凝胶和运行样品时,使用缓冲液。标记和染料用于可视化目的。
什么是电渗?
这是一个过程,通过一个材料通过一个应用的电场。这种运动可以通过多孔材料,沿着毛细管、膜等进行。这可作为分离技术(特别是毛细管电渗透)。液体的速度与外加电场成线性关系。它还取决于用于构建通道的材料和所使用的解决方案。在界面上,溶液和材料获得了相反的电荷,这被称为电双层。当电场作用于溶液时,电双层会被产生的库仑力所移动。这就是所谓的电渗透流。
电泳和电渗有什么区别?•在电泳中,固体颗粒(如核酸或蛋白质等大分子)通过电场移动。但在电渗中,液体是在移动的。•在电泳中,支撑固体材料是凝胶。但它可以是凝胶、膜、毛细管等。 |