遲鈍的(blunt)和粘端結紮術(sticky end ligation)的區別
限制性內切酶是切割雙鏈DNA(dsDNA)的特**酶。它們在分子生物學中也被稱為分子剪刀。限制性內切酶能夠識別dsDNA的特定短序列,即識別位點,並能裂解磷酸二酯和氫鍵以打開雙鏈。不同類型的酶會產生不同類型的鈍端和片段。在生物學中,連接兩條相鄰的DNA鏈的連接酶。這一步稱為結紮,根據DNA末端結紮的類型,可分為鈍端結紮和粘端結紮。鈍端連接和粘端連接的關鍵區別在於,鈍端連接發生在包含兩個鈍端的DN**段之間,而粘端連接發生在5'和3'懸垂之間。與鈍端結紮相比,粘端結紮更有效、更穩定。
內容1。概述和主要區別2。什麼是鈍端結紮3。什麼是粘端結紮4。並排比較-鈍端結紮與粘端結紮5。摘要
什麼是鈍端結紮(a blunt end ligation)?
一些限制性內切酶可以在相反的鹼基上切割DNA,產生鈍端DN**段。這些酶被稱為鈍端切割器;它們直接切割到限制位點的中間,而不會留下單鏈的懸垂鹼基。鈍端也被稱為非懸垂端,因為它們在端部沒有3'和5'的懸垂底座。兩條線的末端都是鈍端的鹼基對。常見的鈍端切割酶有EcoRV-HaeIII、AluI和SmaI。
鈍端結紮是指兩個鈍端之間的結紮。它不是一個突出的鹼基的結紮。這種結紮比粘端結紮效率低。然而,在某些情況下,鈍端連接比粘端連接更有利,尤其是當連接PCR產物時。PCR產物的生產總是有鈍頭。鈍端結紮不需要DNA中互補的末端進行結紮。
什麼是粘端結紮術(a sticky end ligation)?
一些限制性內切酶能夠切割dsDNA,在末端留下一段懸垂的單鏈DNA。這些末端被稱為粘性端或懸垂端。由於末端有不粘的鹼基,需要兩個鹼基之間形成互補的鹼基,因此需要在兩個鹼基之間形成具有粘性的鹼基。因此,有必要對兩個來源的DNA使用相同的限制性酶來產生匹配的連接片段。
粘端連接更有效,通常在克隆過程中非常理想。有幾種限制性酶產生粘性末端。它們是EcoRI,BamHI,HindIII等。
遲鈍的(blunt)和粘端結紮術(sticky end ligation)的區別
鈍端結紮術vs粘端結紮術 | |
鈍端連接發生在兩個鈍端DN**段之間。 | 粘端連接發生在兩個匹配的帶有粘性末端的DN**段之間。 |
酶 | |
鈍頭刀具產生鈍頭。 | 粘性端切刀產生粘性或粘性端部。 |
端部匹配要求 | |
它不需要匹配的片段或互補的鹼基。 | 它需要在末端互補鹼基來形成鹼基對。 |
效率 | |
它的效率不如粘端結紮 | 它比鈍端結紮更有效。 |
總結 - 遲鈍的(blunt) vs. 粘端結紮術(sticky end ligation)
限制性內切酶能夠切割dsDNA併產生不同末端的DN**段。它們識別特定的序列並限制DNA產生粘性和鈍端。粘性的末端在碎片的末端有不成對的鹼基。鈍端是由於直裂而產生的,它們的末端有鹼基對。粘端結紮需要兩個互補的單鏈DN**段。鈍端結紮發生在任何兩個鈍端碎片之間。這就是鈍性結紮和粘性結紮的區別。
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