關鍵區別——革蘭氏染色與培養
革蘭氏染色是根據細菌細胞壁上肽聚糖層的厚度將細菌分為兩類的染色技術。培養是在實驗室條件下培養和維持微生物以進行不同分析的一種方法。革蘭氏染色法是保持革蘭氏菌和細菌培養的關鍵技術。
內容1。概述和主要區別2。什麼是Gram Stain3。什麼是文化4。並列比較——革蘭氏染色與培養5。摘要
什麼是革蘭氏染色(gram stain)？
革蘭氏染色是微生物學中用於細菌鑑定的一種重要的鑑別染色技術。這項技術由丹麥細菌學家漢斯·克里斯蒂安·格拉姆於1884年引進。革蘭氏染色將細菌分為兩大類：革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌，這在細菌分類和鑑定中非常重要。革蘭氏染色是細菌鑑定的第一步。
細菌是根據其細胞壁的不同而分類的。革蘭氏陽性菌在其細胞壁上含有一層厚的肽聚糖層，而革蘭氏陰性菌的細胞壁中含有一層薄的肽聚糖層，如圖01所示。革蘭氏染色的結果將基於細胞壁肽聚糖層的厚度差異。
圖1：革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌
使用四種不同的試劑進行克氏染色，即原染色劑、媒染劑、脫色劑和反染色劑。結晶紫和藏紅花紅分別作為主要著色劑和反著色劑，而克碘和95%乙醇分別作為媒染劑和脫色劑。
克氏染色的基本步驟
- A bacterial **ear is prepared on a clean glass slide, heat fixed and cooled.
- Smear is flooded with crystal violet for 1 – 2 minutes.
- Smear is rinsed with slow running tap water to remove excess stains.
- Grams iodine is applied to the **ear for 1 minute.
- Smear is rinsed with slow running tap water
- Smear is washed with 95% alcohol for 2 – 5 seconds and rinsed with slow running tap water.
- Smear is counter stained with safranin for 1 minute
- Smear is rinsed with slow running tap water, dried and observed under the microscope.
革蘭氏染色結束時，革蘭氏陰性菌呈粉紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色，如圖02所示。革蘭氏染色的結果取決於細胞壁中肽聚糖層的厚度。在脫色步驟中，由於革蘭氏陰性菌具有一層薄的肽聚糖層，原染色劑和媒染劑很容易從革蘭氏陰性菌中去除並變得無色。原染色保留在革蘭氏陽性菌中，因為它們有一層厚的肽聚糖層。反染色對革蘭氏陽性菌無效，因為保留了原染色劑。因此，革蘭氏陽性菌在最初的染色顏色中可見，即紫色。反染色會使革蘭氏陰性菌染色，並且會以藏紅花色（pick color）可見。因此，用革蘭氏染色法將細菌分為兩類，對細菌的鑑別和鑑定具有重要價值。
圖2：革蘭氏菌
什麼是文化(culture)？
微生物培養是一種在實驗室條件下為不同目的培養和維持微生物的方法。根據微生物培養的類型和目的，培養物可在固體、半固體和液體介質中生長。培養物提供微生物所需的必要營養和生長條件。培養基有不同的組分，如能源、碳源、氮源、礦物質、微量營養素、水、固化劑等。最適溫度、氧氣和pH值應根據所培養微生物的類型進行調整。
微生物培養有多種類型，如分批培養、連續培養、刺培養、瓊脂平板培養、肉湯培養等。根據培養基的組成，有合成培養基、半合成培養基和自然培養基。微生物培養物是在無菌條件下在一個稱為層流氣流的特殊腔室中製備的。培養基和玻璃器皿在接種所需微生物之前進行消毒。在適當的無菌條件下，將目標微生物轉入滅菌的營養培養基中，在最佳溫度下培養。在培養基中，微生物利用所提供的營養物質生長繁殖。
圖3：平板上的細菌培養
革蘭氏染色(gram stain)和文化(culture)的區別
| 革蘭氏染色與培養 | |
| 革蘭氏菌是一種用於細菌分化鑑定的差異染色技術。 | 微生物培養是在實驗室培養微生物的一種方法。 |
| 組件 | |
| 這使用不同的試劑，包括兩種染色劑。 | 這就採用了不同的培養基，如固體、半固體和液體培養基等組成營養素的必要條件。 |
| 基本功能 | |
| 這樣就可以將細菌分為兩類：革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌。 | 這就允許微生物為了不同的目的繁殖。 |
| 基地 | |
| 革蘭氏染色結果基於細胞壁肽聚糖層的差異。 | 微生物在培養基中生長繁殖。 |
| 結果 | |
| 革蘭氏陰性菌呈粉紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。 | 在平板上，可以看到微生物的菌落。在液體介質中，微生物以懸浮形式存在。 |
總結 - 革蘭氏染色(gram stain) vs. 文化(culture)
微生物培養物是在實驗室條件下製備和保存的，用於不同的目的，如儲存、測試、化學純化等。革蘭氏染色是一種染色程序，它將細菌分為兩大類，即革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌。因此，革蘭氏染色法與培養法的區別在於，革蘭氏染色法是一種細菌染色法，而培養法是在實驗室培養和維持微生物的方法。
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