親和層析和離子交換色譜的關鍵區別在於,我們可以使用親和色譜分離混合物中帶電荷或不帶電的成分,而我們可以使用離子交換色譜分離混合物中的帶電成分。
色譜法是一種我們可以用來分離混合物中所需成分的技術。液相色譜有液相色譜法、氣相色譜法等不同類型,親和色譜法和離子交換色譜法是液相色譜法的兩大類。此外,在這些技術中,有兩個階段。也就是說,它們是固定相和流動相。這些技術的目的是根據組分在固定相表面上的結合,分離流動相中的組分。
目錄
1. 概述和主要區別
2. 什麼是親和層析
3. 什麼是離子交換色譜法
4. 並列比較-親和色譜法與離子交換色譜法的表格形式
5. 摘要
什麼是親和層析(affinity chromatography)?
親和層析是一種生物化學技術,我們利用這些成分之間的相互作用來分離混合物中的成分。
我們在本案例中使用的交互包括:
- Antigen-antibody interacti***
- Enzyme-substrate interacti***
- Receptor-ligand interacti***
- Protein-nucleic acid interacti***
在這項技術中,我們利用分子的分子特性進行分離。在這裡,我們允許所需化合物通過氫鍵、離子相互作用、二硫鍵橋、疏水相互作用等與固定相相互作用。不與固定相作用的分子將首先洗脫。因此,我們可以把它從混合物中分離出來。所需化合物將保持在固定相上。因此,我們可以用洗脫溶劑將其分離,並使其洗脫分離。
親和層析在使用緩衝溶液從混合物中純化和濃縮物質時非常有用。此外,它有助於減少混合物中不需要的物質。當考慮我們用於這個過程的儀器時,我們應該使用一個充滿固定相的柱。然後,我們應該加載包含我們要分離的生物分子的流動相。接下來,讓它們與固定相結合。此後,使用洗滌緩衝液,我們可以分離非靶生物分子,但目標分子必須對固定相有很高的親和力才能成功分離。
什麼是離子交換色譜法(ion exchange chromatography)?
離子色譜法是一種可以分析離子物質的液相色譜法。通常,我們用它來分析無機陰離子和陽離子(即氯化物和硝酸鹽陰離子以及鉀、鈉陽離子)。雖然不常見,但我們也能分析有機離子。此外,我們可以使用這種技術來純化蛋白質,因為蛋白質是在一定pH值下帶電的分子。在這裡,我們使用一個固體固定相,帶電粒子可以附著在上面。例如,我們可以用樹脂聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物作為固體載體。
為了進一步解釋這一點,固定相有固定離子,如硫酸鹽陰離子或季胺陽離子。如果我們要維持這個系統的中性,每一個都應該與一個反離子(帶相反電荷的離子)相聯繫。在這裡,如果反離子是陽離子,那麼我們將其命名為陽離子交換樹脂。但是,如果反離子是陰離子,那麼這個體系就是陰離子交換樹脂。
離子交換過程有五個主要階段;
- Initial stage
- Adsorption of target
- Starting of elution
- End of elution
- Regeneration
密切關係(affinity)和離子交換色譜法(ion exchange chromatography)的區別
親和層析是一種生化技術,我們利用這些成分之間的相互作用來分離混合物中的組分,而離子色譜法是一種可以分析離子物質的液相色譜法。因此,親和層析和離子交換色譜的主要區別在於,離子交換色譜只能用於離子物質的分離,而親和層析則可以同時分離帶電粒子和不帶電粒子。當考慮其工作原理時,親和層析和離子交換色譜的區別在於,由於目標分子對固定相有很高的親和力,所以親和色譜才得以進行。然而,對於離子交換色譜,目標分子的電荷與固定相表面的電荷相反。
下面的信息圖顯示了親和層析和離子交換色譜的區別,作為並列比較。
總結 - 密切關係(affinity) vs. 離子交換色譜法(ion exchange chromatography)
總之,親和層析和離子交換色譜是兩種形式的液相色譜技術。親和層析和離子交換色譜的關鍵區別在於,我們可以使用親和色譜分離混合物中帶電荷或不帶電的成分,而我們可以使用離子交換色譜分離混合物中的帶電成分。
引用
1“親和層析”,維基百科,維基媒體基金會,2018年10月5日。這裡有2個。歌詞。“離子交換色譜法”,化學圖書館,圖書館,2016年12月29日
2歌詞。“離子交換色譜法”,《化學文摘》,歌詞,2016年12月29日。