色差聚焦與等電聚焦的關鍵區別在於，色差聚焦是一種利用離子交換樹脂的柱層析方法，而等電聚焦是一種利用固定化pH梯度凝膠的電泳技術。
染色聚焦和等電聚焦是根據蛋白質的等電點分離蛋白質的兩種技術。色差聚焦和等電聚焦都有很高的分辨率。色譜聚焦法是一種高分辨率的柱層析方法，而等電聚焦是一種電泳分離方法。此外，色差聚焦不需要電場，而等電聚焦需要電場。
目錄
1. 概述和主要區別
2. 什麼是色差聚焦
3. 什麼是等電聚焦
4. 色差聚焦與等電聚焦的相似性
5. 並排比較-色譜聚焦與等電聚焦的表格形式
6. 摘要
什麼是色差聚焦(chromatofocusing)？
色譜聚焦法是一種根據蛋白質等電點的差異來分離蛋白質的高效洗脫色譜法。它使用離子交換樹脂柱和內部開發的pH梯度。與等電聚焦不同，色差聚焦不涉及電場。色差聚焦技術是一種強大的純化技術，它可以分離高度相似的分子，甚至只有0.02個pH單位的差別。因此，當分離非常相似的成分時，色差聚焦最適合作為最終拋光步驟。
在色差聚焦法中，通過將樣品與起始緩衝液混合應用於色譜柱。pH值高於等電點的蛋白質帶負電，它們保持在柱的頂部附近，而其他pH值低於等電點的蛋白質則向下遷移。等電點最高的蛋白質先洗脫，等電點最低的蛋白質最後從柱上洗脫。該方法受蛋白質沉澱和pH梯度線性等因素的影響。
什麼是等電聚焦(isoelectric focusing)？
等電聚焦是根據分子的等電點來分離不同分子的技術。它也被稱為電聚焦。這種技術通常用於凝膠中的蛋白質分離。在等電聚焦中，將樣品加入固定化pH梯度（IPG）凝膠中。IPG凝膠是一種具有pH梯度的丙烯酰胺凝膠基質。蛋白質向陰極遷移，直到找到等電點的pH區。當蛋白質達到沒有淨電荷的pH值時，遷移停止併產生一個固定帶。同樣，每種蛋白質在pH梯度的某一點上都有一條帶，與它的等電點相對應。
圖01：等電聚焦
等電聚焦是雙向凝膠電泳的第一步。該技術首先通過等電聚焦法，按等電點分離蛋白質，然後用SDS-PAGE分子量進行分離。
色差聚焦(chromatofocusing)和等電聚焦(isoelectric focusing)的共同點
- 色差聚焦和等電聚焦是兩種高分辨率的方法。
- 兩者都是基於蛋白質的等電點。
- 這些技術使用pH梯度。
- 這兩種方法對人類血紅蛋白變異的特徵描述都是有用的。
- 它們能分辨出π值相差0.02個pH單位的分子。
色差聚焦(chromatofocusing)和等電聚焦(isoelectric focusing)的區別
色譜聚焦技術是一種根據蛋白質等電點分離蛋白質的高分辨率柱層析技術。相比之下，等電聚焦是一種電泳技術，它通過沿毛細管內形成的pH梯度施加電場，根據蛋白質的等電點分離蛋白質。所以，這就是染色聚焦和等電聚焦的關鍵區別。
色差聚焦和等電聚焦的另一個區別是色差聚焦不涉及電場，而等電聚焦需要電場。
總結 - 色差聚焦(chromatofocusing) vs. 等電聚焦(isoelectric focusing)
色差聚焦和等電聚焦是兩種相似的技術，它們對分子，特別是非常相似的分子具有很高的分辨能力。色譜聚焦是一種高分辨率的柱層析技術，而等電聚焦是一種電泳方法。與等電聚焦不同，色差聚焦不涉及電場。因此，本文總結了色差聚焦和等電聚焦的區別。
引用
1“色差聚焦：原理和方法”，西格瑪，
2“等電聚焦”。英語維基百科.Org2020年，
