色差聚焦与等电聚焦的关键区别在于，色差聚焦是一种利用离子交换树脂的柱层析方法，而等电聚焦是一种利用固定化pH梯度凝胶的电泳技术。
染色聚焦和等电聚焦是根据蛋白质的等电点分离蛋白质的两种技术。色差聚焦和等电聚焦都有很高的分辨率。色谱聚焦法是一种高分辨率的柱层析方法，而等电聚焦是一种电泳分离方法。此外，色差聚焦不需要电场，而等电聚焦需要电场。
目录
1. 概述和主要区别
2. 什么是色差聚焦
3. 什么是等电聚焦
4. 色差聚焦与等电聚焦的相似性
5. 并排比较-色谱聚焦与等电聚焦的表格形式
6. 摘要
什么是色差聚焦(chromatofocusing)？
色谱聚焦法是一种根据蛋白质等电点的差异来分离蛋白质的高效洗脱色谱法。它使用离子交换树脂柱和内部开发的pH梯度。与等电聚焦不同，色差聚焦不涉及电场。色差聚焦技术是一种强大的纯化技术，它可以分离高度相似的分子，甚至只有0.02个pH单位的差别。因此，当分离非常相似的成分时，色差聚焦最适合作为最终抛光步骤。
在色差聚焦法中，通过将样品与起始缓冲液混合应用于色谱柱。pH值高于等电点的蛋白质带负电，它们保持在柱的顶部附近，而其他pH值低于等电点的蛋白质则向下迁移。等电点最高的蛋白质先洗脱，等电点最低的蛋白质最后从柱上洗脱。该方法受蛋白质沉淀和pH梯度线性等因素的影响。
什么是等电聚焦(isoelectric focusing)？
等电聚焦是根据分子的等电点来分离不同分子的技术。它也被称为电聚焦。这种技术通常用于凝胶中的蛋白质分离。在等电聚焦中，将样品加入固定化pH梯度（IPG）凝胶中。IPG凝胶是一种具有pH梯度的丙烯酰胺凝胶基质。蛋白质向阴极迁移，直到找到等电点的pH区。当蛋白质达到没有净电荷的pH值时，迁移停止并产生一个固定带。同样，每种蛋白质在pH梯度的某一点上都有一条带，与它的等电点相对应。
图01：等电聚焦
等电聚焦是双向凝胶电泳的第一步。该技术首先通过等电聚焦法，按等电点分离蛋白质，然后用SDS-PAGE分子量进行分离。
色差聚焦(chromatofocusing)和等电聚焦(isoelectric focusing)的共同点
- 色差聚焦和等电聚焦是两种高分辨率的方法。
- 两者都是基于蛋白质的等电点。
- 这些技术使用pH梯度。
- 这两种方法对人类血红蛋白变异的特征描述都是有用的。
- 它们能分辨出π值相差0.02个pH单位的分子。
色差聚焦(chromatofocusing)和等电聚焦(isoelectric focusing)的区别
色谱聚焦技术是一种根据蛋白质等电点分离蛋白质的高分辨率柱层析技术。相比之下，等电聚焦是一种电泳技术，它通过沿毛细管内形成的pH梯度施加电场，根据蛋白质的等电点分离蛋白质。所以，这就是染色聚焦和等电聚焦的关键区别。
色差聚焦和等电聚焦的另一个区别是色差聚焦不涉及电场，而等电聚焦需要电场。
总结 - 色差聚焦(chromatofocusing) vs. 等电聚焦(isoelectric focusing)
色差聚焦和等电聚焦是两种相似的技术，它们对分子，特别是非常相似的分子具有很高的分辨能力。色谱聚焦是一种高分辨率的柱层析技术，而等电聚焦是一种电泳方法。与等电聚焦不同，色差聚焦不涉及电场。因此，本文总结了色差聚焦和等电聚焦的区别。
引用
1“色差聚焦：原理和方法”，西格玛，
2“等电聚焦”。英语维基百科.Org2020年，
