主要区别
I型和II型限制酶的主要区别在于,I型限制酶与II型限制酶相比非常复杂,除此之外,I型限制酶由三个不完全相同的亚单位组成。而另一方面,Ⅱ型限制酶是由两个相同的亚基组成的单位。核酸酶在DNA内部切割的酶被称为限制性酶。这些限制性酶的切割点在DNA的中间,而不是在末端。由于限制性酶的这种特性,它们被称为内切酶。这些限制也被称为分子剪刀、分子刀、分子手术刀或限制酶。识别位点或限制位点是这些限制性酶切割DNA的区域。这个限制点至少有4-8个基地巴黎。那里是这些限制性酶的三组,如下所示:
- Ⅰ型限制性内切酶
- Ⅱ型限制性内切酶
- Ⅲ型限制性内切酶
Ⅰ型限制酶
Ⅰ型酶是一个多亚单位,是修饰酶和限制性酶的复杂组合。这些酶在随机点切割DNA,但与它们的识别序列相距甚远。这些酶被认为是非常罕见的,但现在经过对测序基因组的分析,我们发现它们是常见的。Ⅰ型限制性酶不形成凝胶带型或离散的限制性片段,因此它们在实际应用中不如II型酶那么多,但它们确实具有特殊的生物化学意义。
Ⅱ型限制酶
在它们的位置识别,或接近它们的位置。除此之外,它们确实会产生不连续的凝胶条带和不连续的碎片。它们具有很高的实用价值,使用非常普遍。它们在商业上随处可见。这些酶大多以同型二聚体的形式与DNA结合,它们也能识别对称的DNA序列。有些限制性酶也能识别不对称的DNA序列,因为它们以异二聚体的形式结合。有些酶也能识别连续序列。在这些序列中,识别序列的两个半位点相邻。其中一些酶还识别不连续的序列,其中一半位点彼此分离。发生在DNA中的裂解在一侧留下5个磷酸,在另一侧留下3个羟基。它们较小,子单位在200-350之间。最常见的II型酶是II型。它们在识别部位的外面向一边劈开。它们大小正常,能识别非对称连续的序列。它们有两个结构域,一个用于DNA,另一个用于DNA裂解。在大多数情况下,它们以单体的形式与DNA结合。DNA链中含有不同的识别位点,Ⅱ型识别酶在其上非常活跃。另一种II型酶是IIG型。它们有限制酶和修饰酶,而且体积大。
主要区别
- I型限制性酶比II型限制性酶更复杂。
- Ⅰ型识别酶由三个不完全相同的亚单位组成。II型识别酶由两个相同的亚单位组成。
- Ⅰ型限制酶的分子量为400000道尔顿。Ⅱ型限制性酶的分子量为20000-100000道尔顿。
- Ⅰ型限制性酶切位点距识别位点1000个核苷酸。Ⅱ型限制性酶切位点在同一识别位点。
- 切割序列在Ⅰ型限制性酶中是非特**的。切割序列在II型限制性酶中具有特**。
- I型酶负责甲基化保护DNA,而II型酶没有甲基化活性。
- 激活Ⅰ型酶需要ATP、Mg2+和腺苷蛋氨酸。对于II型酶的激活,只需要Mg2+。
- Ⅰ型酶具有核酸内切酶和甲基化酶活性。Ⅱ型仅具有限制性酶活性,不具有核酸内切酶和甲基化酶活性。
- Ⅰ型酶比Ⅱ型酶早。
- 在两种不同的大肠杆菌中鉴定出Ⅰ型。
- Ⅰ型酶的例子是,Ecok和EcoB。II型酶的例子有Hind II和EcoRI。