如何制作10倍tbe电泳缓冲液(make 10x tbe electrophoresis buffer)
TBE和TAE在分子生物学中用作缓冲液，主要用于核酸电泳。Tris缓冲液用于稍碱性的pH条件下，如DNA电泳，因为这会使DNA在溶液中可溶并脱质子，因此它会被吸引到正极并通过凝胶迁移。EDTA是溶液中的一种成分，因为这种常见的螯合剂可以防止核酸被酶降解。EDTA螯合二价阳离子，二价阳离子是可能污染样品的核酸酶的辅因子。然而，由于镁离子是DNA聚合酶和限制性内切酶的辅助因子，因此有意将EDTA的浓度保持在较低的水平（约1mm浓度）。
10倍tbe电泳缓冲材料
- 108克三烷基[三（羟甲基）氨基甲烷]
- 55克硼酸
- 7.5克EDTA二钠盐
- 去离子水
10倍tbe电泳缓冲液的制备
- 将Tris、硼酸和EDTA溶解在800 ml去离子水中。
- 将缓冲液稀释至1 L。将溶液瓶置于热水浴中，可使未溶解的白色团块溶解。磁性搅拌棒有助于这一过程。
您不需要对溶液进行消毒。虽然沉淀可能在一段时间后发生，但储备溶液仍然可用。您可以使用pH计调整pH值，并逐滴添加浓盐酸（HCl）。在室温下储存TBE缓冲液是可以的，尽管您可能希望通过0.22微米的过滤器过滤原液，以去除会促进沉淀的颗粒。
10倍tbe电泳缓冲存储器
在室温下储存一瓶10倍的缓冲溶液。冷藏会加速降水。
使用10倍tbe电泳缓冲液
使用前先将溶液稀释。用去离子水将100毫升10倍的储备溶液稀释至1升。
5x tbe储备溶液配方
5X溶液的优点是不易沉淀。
- 54克Tris碱（Trizma）
- 27.5克硼酸
- 20毫升0.5 M EDTA溶液
- 去离子水
准备
- 将Tris碱和硼酸溶解在EDTA溶液中。
- 使用浓盐酸将溶液的pH值调节至8.3。
- 用去离子水稀释溶液，制成1升5X储备溶液。溶液也可稀释至1X或0.5X进行电泳。
偶然使用5倍或10倍的储备溶液会给你带来糟糕的结果，因为会产生同样多的热量。除了分辨率差外，样品可能会损坏。
0.5倍tba缓冲配方
- 5X TBE储备溶液
- 蒸馏去离子水
准备
将100毫升5X TBE溶液加入900毫升蒸馏去离子水中。使用前彻底搅拌。
局限性
尽管TBE和TAE是常见的电泳缓冲液，但对于低摩尔浓度的导电溶液，还有其他选择，包括硼酸锂缓冲液和硼酸钠缓冲液。TBE和TAE的问题在于，基于Tris的缓冲液限制了电泳中可以使用的电场，因为过多的电荷会导致温度失控。
- 发表于 2021-10-14 06:46
- 阅读 ( 270 )
- 分类：数学
你可能感兴趣的文章
特里斯(tris)和tris基(tris base)的区别
...这种化合物在7.0到9.0的pH范围内效果更好。可用于SDS-PAGE缓冲液的制备。 图01:Tris分子的化学结构 什么是特里斯基地(tris base)？ 三基或三羟甲基氨基甲烷是化学式为C4H11NO3的化合物。我们可以把这个化合物缩写为THAM。Tris碱是一种...
电泳(electrophoresis)和介电泳(dielectrophoresis)的区别
.... 并列比较-电泳与介电泳的表格形式 5. 摘要 什么是电泳(electrophoresis)？ 电泳是一种分析技术，它可以利用样品中化学物质的电学性质来分析样品。在这里，我们可以观察到分散的溶质在所分析的介质中的运动。因此，我们可以...
缓冲作用(buffer action)和缓冲容量(buffer capacity)的区别
...氢离子或氢离子时对pH值变化的抵抗力。我们可以用改变缓冲液pH值所需的酸或碱的量除以pH值的变化和缓冲溶液的体积来计算这个值。 图01：显示系统缓冲容量的示例图 由于溶液中存在的缓冲剂消耗了添加到缓冲溶液中的酸或...
1天(1d)和二维凝胶电泳(2d gel electrophoresis)的区别
...2D表格形式的凝胶电泳 6. 摘要 什么是一维凝胶电泳(1d gel electrophoresis)？ 一维凝胶电泳又称一维凝胶电泳，是一种基于分子量的蛋白质分离方法。蛋白质分离主要采用聚丙烯酰胺凝胶电泳。基于凝胶电泳的概念，分子根据其分子...
tris基(tris base)和盐酸三氯氢钠(tris hcl)的区别
...被称为THAM。它是一种有机化合物，用作缓冲溶液TAE和TBE缓冲液的成分。 图1:Tris碱的化学结构 这种化合物含有一个伯胺基。因此，它可以进行典型伯胺所经历的反应，例如：与醛的缩合反应。这种化合物的基本性质是由这个胺基...
水平的(horizontal)和垂直凝胶电泳(vertical gel electrophoresis)的区别
...电泳的表格形式 6. 摘要 什么是水平凝胶电泳(horizontal gel electrophoresis)？ 水平凝胶电泳是根据DNA、RNA或蛋白质分子的大小和电荷来分离它们的基本理论。在这种技术中，凝胶以水平方向存在，并浸入连续的缓冲液中。琼脂糖凝胶...
毛细管电泳(capillary electrophoresis)和凝胶电泳(gel electrophoresis)的区别
...电泳和凝胶电泳的表格形式 6. 摘要 什么是凝胶电泳(gel electrophoresis)？ 凝胶电泳是一种根据电荷、大小和形状分离核酸、蛋白质或氨基酸的技术。这项技术使用一种物理凝胶，它是一种聚合物物质，作为分离介质。最常用的凝胶...
凝胶电泳(gel electrophoresis)和电泳(sds page)的区别
凝胶电泳(gel electrophoresis)和电泳(sds page)的区别 凝胶电泳是一种在电场中分离大分子的技术。根据分子生物学中的大小，把RNA和蛋白质分开是一种常见的方法。SDS-Page是一种凝胶电泳，用于根据蛋白质的大小从蛋白质混合物中...
电泳(electrophoresis)和色谱法(chromatography)的区别
.... 并排比较-电泳和色谱法的表格形式 5. 摘要 什么是电泳(electrophoresis)？ 电泳是一种实验室技术，我们利用样品中存在的化学物质的电性质来分析样品。在那里，我们可以观察到分散粒子在样品中的运动。因此，我们可以确定化...
电泳(sds page)和凝胶电泳(gel electrophoresis)的区别
SDS-PAGE与凝胶电泳 电泳可以用来确定物体的质量，通常用于蛋白质和脱氧核糖核酸（DNA）。当DNA链被引入化学物质时，可能会加速或减慢信息处理。已知质量的DNA标记被用来估计电泳结束后物体的大小。电泳很可能是分子生物...
0 篇文章
