关键区别-水平和垂直凝胶电泳
凝胶电泳是一种用于遗传学的实验室技术,用于根据DNA、RNA和其他蛋白质的电荷和分子大小来分离混合物。在这种方法中需要分离的DNA、RNA或蛋白质通过含有小孔的凝胶。分子在电场的作用下通过凝胶。分子通过凝胶的速度和它们通过凝胶的长度成反比。因此,分子量小的分子比分子量大的分子运动得快。电场是由凝胶两端的电荷差产生的。一端带正电荷,另一端带负电荷。由于DNA和RNA分子带负电,它们会被吸引到凝胶带正电荷的一端。凝胶电泳有两种不同的方法:水平凝胶电泳和垂直凝胶电泳。在水平凝胶电泳中,凝胶以水平方向存在,并浸没在凝胶盒内的连续流动缓冲液中。在垂直凝胶电泳中,缓冲系统是垂直的,不连续,在顶部和底部分别有一个阴极和一个阳极的两个室。这是水平和垂直凝胶电泳的关键区别。
目录
1. 概述和主要区别
2. 什么是水平凝胶电泳
3. 什么是垂直凝胶电泳
4. 水平和垂直凝胶电泳的相似性
5. 并列比较-水平和垂直凝胶电泳的表格形式
6. 摘要
什么是水平凝胶电泳(horizontal gel electrophoresis)?
水平凝胶电泳是根据DNA、RNA或蛋白质分子的大小和电荷来分离它们的基本理论。在这种技术中,凝胶以水平方向存在,并浸入连续的缓冲液中。琼脂糖凝胶用于将凝胶盒分成两个隔间。凝胶盒的一端包含阳极,而另一端包含阴极。当施加电流时,该技术中使用的缓冲器允许产生电荷梯度。当充电时,凝胶会变热。缓冲液还起到冷却液的作用,使温度保持在最佳水平。运行缓冲液的再循环可防止pH梯度的形成。水平凝胶电泳不能采用间断缓冲系统,因为凝胶系统的两个隔室与运行缓冲区相连。丙烯酰胺用于凝胶电泳分离蛋白质混合物。
在水平凝胶电泳中,由于凝胶盒暴露于氧气中,因此不能使用丙烯酰胺。由于氧气的存在,丙烯酰胺的聚合受到抑制,这会干扰凝胶的形成。水平凝胶电泳是一种简单易行的分离DNA和RNA的方法。
什么是垂直凝胶电泳(vertical gel electrophoresis)?
垂直凝胶电泳技术根据凝胶电泳的基本原理发挥作用,但它被认为比水平凝胶电泳更复杂。这种技术利用了一个不连续的缓冲区。阴极位于顶部腔室中,阳极位于底部腔室中。每个隔室中的电极提供所需的电场。在两个安装好的玻璃板之间注入一层薄薄的凝胶。因此,凝胶的顶部浸没在顶部腔室中,而凝胶的底部部分浸没在底部的腔室中。一旦施加电流,一小部分缓冲液通过凝胶从顶部腔室移到底部腔室。这项技术的电流是以分钟为单位的。
在垂直凝胶电泳中,缓冲液只流过凝胶。这使得在分离阶段可以精确控制电压梯度。由于隔室不暴露于大气中的氧气,因此可以使用丙烯酰胺凝胶。由于丙烯酰胺凝胶的孔径较小,因此可以获得更高分辨率的精确分离。
水平的(horizontal)和垂直凝胶电泳(vertical gel electrophoresis)的共同点
- 这两个系统都是根据凝胶电泳的基本理论来工作的。
- 阳极和阴极用于提供两个系统所需的电场。
水平的(horizontal)和垂直凝胶电泳(vertical gel electrophoresis)的区别
水平和垂直凝胶电泳 | |
水平凝胶电泳是凝胶以水平方向存在的凝胶电泳技术。 | 垂直凝胶电泳是一种凝胶垂直定向的凝胶电泳技术。 |
缓冲器 | |
水平凝胶电泳由一个连续的缓冲液组成。 | 在垂直凝胶电泳中,流动缓冲区是不连续的。 |
丙烯酰胺的使用 | |
丙烯酰胺不能用于水平凝胶电泳,因为凝胶盒暴露在大气中的氧气中。 | 由于凝胶不暴露于大气中的氧气,由于两个独立的室,丙烯酰胺可用于垂直凝胶电泳。 |
功能 | |
水平凝胶电泳更常用于分离DNA和RNA混合物,但不用于蛋白质。 | 垂直凝胶电泳用于分离蛋白质混合物。 |
总结 - 水平的(horizontal) vs. 垂直凝胶电泳(vertical gel electrophoresis)
凝胶电泳是一种广泛应用于分离含有DNA、RNA和蛋白质分子混合物的实验室技术。凝胶电泳有两种方法:水平和垂直凝胶电泳。在水平凝胶电泳中,流动缓冲区是连续的,而在垂直凝胶电泳中,流动缓冲区是不连续的。这就是水平和垂直凝胶电泳的区别。这两个系统都是根据凝胶电泳的共同原理来工作的。
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引用
1.Warren,Chad M.等人。“高分子量蛋白质的垂直琼脂糖凝胶电泳和电印迹”,电泳,第24卷,第11期,2003年,第1695-1702页。,doi:10.1002/elps.200305392.2。“水平和垂直凝胶系统-水平凝胶系统。”国家诊断,可在这里获得。访问日期:2017年8月28日。