如何进行移液管校准(do pipette calibration)

移液管是一种实验室设备,用于测量和转移非常小体积的液体。移液管测量的准确性和精密度是必要的,因为任何分配的体积差异都可能影响实验结果。为确保准确度,有必要每隔几个月检查一次移液管校准。校准过程有助于检查设备是否分配了适当的容量,以便在没有的情况下进行固定。...

第1部分第1部分,共2部分:检查校准

  1. 1收集必要的材料。要检查移液管的校准,需要移液管、移液管尖端、蒸馏水、烧杯、温度计、天平和称重船。天平需要特定于微克,以校准最大为1µL的微量移液管。您不需要超过5毫升的水。把烧杯装满水。确保移液管尖端与移液管正确配合。
  2. Image titled Do Pipette Calibration Step 1
  3. 2测量蒸馏水的温度。将温度计放入水中,并至少放置一分钟。如果温度计上的红线仍在移动,请再等一分钟。一分钟后,在笔记本上记录温度。取下温度计,完成后擦干。了解水温对于检查校准所需的计算非常重要。
  4. Image titled Do Pipette Calibration Step 2
  5. 3将称重船放在天平上,并将其归零。理想情况下,你将使用一个有门的天平,它是一个隔离的房间。将称重船放入称重室内并关闭门。如果没有门,只需将称重船放在天平上即可。按下“零”或“皮重”按钮,等待天平读数为零。将天平归零会减去塑料船的重量,这样你就可以只测量你放在船上的任何东西的重量。
  6. Image titled Do Pipette Calibration Step 3
  7. 4准备好移液管进行校准。开始之前,用乙醇擦拭移液管,以清除任何污染物,并确保移液管尖端没有堵塞物。将适当的尖端放在末端,并设置要测试的音量。对于校准,测试移液管可以分配的最小体积和最大体积。
  8. Image titled Do Pipette Calibration Step 4
  9. 5校准前,先冲洗针尖。将按钮按到第一个止动位置,将尖端插入蒸馏水中,使大约2 mm浸入液体中。松开按钮吸一些液体,然后按下按钮再次分配液体。重复此步骤三次,以预冲洗尖端。将按钮按到第二个停止位置,以分配尖端中残留的任何液体,并从水中取出移液管。
  10. Image titled Do Pipette Calibration Step 5
  11. 6吸入校准体积。在尖端离开液体的情况下,按下按钮至第一个止点。将约2 mm的尖端放入蒸馏水中,松开按钮,将液体吸入尖端。等待约1秒钟,然后将尖端从水中取出。在整个吸入过程中,确保尖端完全浸没。你不希望尖端有气泡,否则结果会出错。
  12. Image titled Do Pipette Calibration Step 6
  13. 7.将液体分配到天平上的称重船中。将尖端靠在称重船底部,按下按钮至第一个止点。移动到另一个稍微远离水面的位置,并将按钮按到第二个停止位置。按住按钮,将尖端提离称重船。将针尖放在移液管上,以便再次使用它进行更多校准测试。确保尖端不会碰到任何东西。
  14. Image titled Do Pipette Calibration Step 7
  15. 8.在天平上记录重量。如果使用室内天平,请关门。等到数字停止变化。把这个号码记在你的笔记本上。重要的是要等到数字稳定后再记录。如果你不等待,你的读数就会不正确。
  16. Image titled Do Pipette Calibration Step 8
  17. 9重复此过程,至少读取10个读数。将天平归零,预先冲洗尖端,吸入相同体积的液体,分配体积,然后记录重量。你希望有多个相同音量的录音,然后你可以将它们平均起来。你可以在不同的卷上重复同样的过程,只要你在每个卷上读取多个读数。
  18. Image titled Do Pipette Calibration Step 9

第2部分第2部分,共2部分:计算结果

  1. 1定义计算体积的公式。用于计算移液管分配的体积的公式为V=w*Z,其中w是水的重量,Z是基于水的密度的转换系数,V是分配多少水的计算体积。通过使用实验开始时记录的温度查找水的密度,可以找到Z变量。例如:如果水的温度为23°C,则使用Z值1.0035µg/mg。
  2. Image titled Do Pipette Calibration Step 10
  3. 2将重复数平均在一起。你应该称量移液管分配的水量至少10次。为了将所有这些值相加求平均值,将它们相加并除以10。如果你做了更多或更少的试验,将每个试验相加,除以试验总数。例如:对于10µL的移液管体积,您记录的10个重量如下:9.89、10.01、10.02、9.99、9.95、10.04、9.96、10.01、9.99和9.98。平均值为:(9.89+10.01+10.02+9.99+9.95+10.04+9.96+10.01+9.99+9.98)/10=99.84/10=9.984
  4. Image titled Do Pipette Calibration Step 11
  5. 3将变量插入方程并求解。一旦确定了每个变量使用的正确数字,就可以将它们插入方程中,并求解计算出的体积。要解决这个问题,只需将所有试验的平均重量乘以Z值即可。例如:V=w*Z=9.984*1.0035=10.019
  6. Image titled Do Pipette Calibration Step 12
  7. 4计算移液管的准确度。要计算准确度,可以使用方程式A=100 x Vavg/V0,其中A是移液管的准确度,Vavg是平均计算体积,V0是设置移液管分配的值。准确度应在99-101%之间。如果移液管已正确校准,则计算值应非常接近您在移液管上设置的实际值。例如:A=100 x Vavg/V0=100 x 10.019/10=100 x 1.0019=100.19%此特定移液管已正确校准。
  8. Image titled Do Pipette Calibration Step 13
  9. 5如有必要,发送移液管进行校准。如果移液管未通过校准测试,请立即停止使用它进行实验。移液管是非常精密和昂贵的实验室设备。您无法自行修复校准,因此需要将其送去进行适当的维修。或者,一些公司会到你的实验室校准你的移液管。联系生产您的特定品牌移液管的公司进行维修。
  10. Image titled Do Pipette Calibration Step 14
  • 发表于 2022-03-23 04:59
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  • 分类:教育

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