核糖核酸(RNA)提取是分子生物学研究中常用的一个实验室过程。通过分离RNA链,研究人员可以研究从细菌到人类的各种生物体的遗传成分。尽管脱氧核糖核酸(DNA)是与遗传研究相关的最常见的核酸,但RNA是DNA和负责各种结构作用的细胞蛋白质之间的联系。提取RNA使科学家能够研究从DNA信息到蛋白质生产和细胞功能的途径。
核酸,以DNA和RNA的形式,持有细胞运作和复制所需的遗传信息。核糖核酸,或RNA,是DNA和细胞蛋白质之间的联系。特定类型的RNA复制DNA的特定部分,以协助形成这种蛋白质。追踪DNA和细胞蛋白质之间的路径有助于研究人员了解基因调节和单个细胞内的蛋白质合成。促进RNA提取和确保样品稳定性的过程为研究人员提供了跟踪DNA和RNA之间路径的手段。
在RNA提取过程中,生物样本被还原和纯化到一定程度,从而分离出RNA供以后检查。分子成分,如蛋白质、RNA和DNA,在不同的时间分割或分离,允许提取特定类型的RNA。不同的组织和细胞类型需要不同的RNA提取方法。虽然有多种方法可以进行RNA提取,但最常见的是用离心法将生物样本与各种化合物混合,这些化合物统称为变性剂。
一种常见的RNA提取方法是苯酚-氯仿提取,也被称为PC或PCIA。使用这种方法,将组织样本与等量的苯酚和氯仿混合。被称为双相混合物,该溶液在变性溶液中被离心。产生两个相,第一个是水相,第二个是有机相。正是在水相中,RNA的提取在乙醇沉淀的帮助下发生。
其他提取RNA的方法各不相同,取决于样品大小、组织类型,以及是否需要全部或部分RNA。对于酵母、植物或动物样品,需要完整的RNA,或总的真核生物RNA,样品。另一方面,细菌则需要原核生物的总RNA。每种类型的RNA都需要不同的样品制备、提取和储存方法。
RNA提取的并发症很常见,一般与提取后RNA的降解有关。通常存在于组织样本中的核糖核酸酶会迅速降解RNA。如果不迅速使用,RNA的降解会使样品失去作用。作为回应,许多RNA提取方法包括在提取前后准备储存样品的步骤,以减少或减缓RNA的分解。
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