染色體行走(chromosome walking)和跳躍的(jumping)的區別
染色體行走和染色體跳躍是分子生物學中用於染色體上基因定位和基因組物理定位的兩種技術手段。染色體行走是一種通過重複分離和克隆基因組文庫中相鄰克隆來克隆目標基因的技術。染色體跳躍是染色體行走的一種特殊形式,它克服了染色體行走的斷點。染色體行走只能對較小長度的染色體進行排序和繪製,而染色體跳躍則可以對大部分染色體進行排序。這就是染色體行走和染色體跳躍的關鍵區別。
內容1。概述和主要區別2。什麼是染色體行走3。什麼是染色體跳躍。並排比較——染色體行走與跳躍5。摘要
什麼是染色體行走(chromosome walking)?
染色體行走是一種利用重疊限制片段探索染色體未知序列區域的工具。在染色體行走過程中,一個已知基因的一部分被用作探針,並繼續描述待繪製或測序的染色體的全長。從標記到目標長度。在染色體行走中,每個重疊片段的末端用於雜交,以識別下一個序列。
探針是從克隆的DN**段中製備出來的,並進行亞克隆。然後它們被用來尋找下一個重疊的片段。所有這些重疊序列被用來構建染色體的遺傳圖譜和定位目標基因。這是一種通過重組基因組文庫中的重疊片段分析長片段DNA的方法。
染色體行走技術-步驟
- 分離含有已知基因或標記物的DN**段
- 製備所選片段的限制性圖譜並對片段末端進行亞克隆以用作探針
- 探針與下一個重疊片段雜交
- 製備片段1的限制性圖譜並對片段1的末端區域進行亞克隆,以用作識別下一個重疊片段的探針。
- 探針與下一個重疊片段2雜交
- 製備片段2的限制性圖譜,並對片段2的末端進行亞克隆,作為下一個重疊片段鑑定的探針
以上步驟應持續到目標基因或序列全長的3'端。
染色體行走是細胞遺傳學的一個重要方面,它可以發現許多生物體的snp,分析遺傳性疾病和發現相關基因的突變。
什麼是染色體跳躍(chromosome jumping)?
染色體跳躍是一種用於生物染色體定位的物理技術。這項技術是為了克服克隆過程中發現重複DNA區域而產生的染色體行走障礙。因此,染色體跳躍技術可以看作是染色體行走的一種特殊形式。與染色體行走相比,它是一種快速的方法,可以繞過染色體行走過程中不易克隆的重複DNA序列。染色體跳躍縮小了目標基因和已知的基因組圖譜標記之間的差距。
染色體跳躍工具首先用特殊的限制性內切酶切割特定的DNA,然後將片段連接成環狀環。然後用一個已知序列設計的引物對循環迴路進行排序。這種引物能以另一種方式跳躍和排序。因此,它可以繞過重複的DNA序列,快速穿過染色體尋找目標基因。
囊性纖維化疾病基因編碼的發現是通過染色體跳躍工具完成的。結合起來,染色體跳躍和行走可以增強基因組作圖過程。
染色體行走(chromosome walking)和跳躍的(jumping)的區別
染色體行走與跳躍 | |
染色體是分子生物學中用於基因組定位和定位特定基因的工具。 | 染色體跳躍是一種用於基因組物理定位和快速發現染色體中靶基因的工具。 |
序列比較長度 | |
只有很小的片段可以通過染色體行走來克隆。 | 較大長度的染色體可以通過染色體跳躍來繪製。 |
染色體重複DNA的克隆 | |
染色體行走技術很難在染色體中找到重複的DNA序列。 | 它可以繞過重複的DNA序列。因此,在測序過程中找到它們並不困難。 |
影響過程的因素 | |
這個過程的成功取決於基因組的大小以及從已知基因組位置到所需基因的距離。 | 成功與否並不取決於從標記到目標的距離的基因組大小。 |
未閉合DNA的影響 | |
染色體行走可以被未閉合的DN**段阻止。 | 皮科羅能演奏的最低音符是D4。 |
需要已知序列 | |
這個過程從目標附近的已知基因開始。 | 這個過程需要一個已知的片段來設計引物。 |
總結 - 染色體行走(chromosome walking) vs. 跳躍的(jumping)
當已知一個特定的基因位於染色體中先前克隆的基因附近,並且可以通過從基因組文庫中重複分離相鄰的基因組克隆來識別它時,染色體行走經常被應用。然而,當在染色體行走技術中發現重複的DNA區域時,這個過程就不能繼續了。因此,這項技術突破了這一點。染色體跳躍是一種克服這一侷限性的分子生物學工具。它繞過了這些難以克隆的重複DNA區域,有助於基因組的物理定位。行走和跳躍的主要區別是染色體跳躍。