蔗糖梯度和蔗糖緩衝超速離心的關鍵區別在於,在蔗糖梯度超速離心中,使用連續的蔗糖梯度,而在蔗糖緩衝超速離心中,使用不連續的蔗糖梯度。
蔗糖梯度法和蔗糖緩衝超速離心法是分離特定類型大分子的兩種類似的技術。在這兩種技術中,使用蔗糖密度梯度。但在蔗糖梯度超速離心中,使用連續的密度梯度,而在蔗糖緩衝超速離心中,使用不連續的密度梯度。
目錄
1. 概述和主要區別
2. 什麼是蔗糖梯度超速離心
3. 什麼是蔗糖緩衝超速離心
4. 蔗糖梯度法與蔗糖緩衝超速離心法的相似性
5. 並列比較-蔗糖梯度與蔗糖緩衝超速離心表格式
6. 摘要
什麼是蔗糖梯度離心(sucrose gradient ultracentrifugation)?
蔗糖梯度超速離心技術是一種可以分離DNA、RNA和蛋白質等大分子的技術。這項技術有幾個步驟。它們是蔗糖梯度製備、離心、分離和洗脫。梯度是這一步的關鍵技術。在這項技術中,樣品含有不同大小的大分子被分層在蔗糖梯度柱的表面。離心時,不同大小的大分子以不同的速率通過蔗糖梯度柱沉澱。沉降取決於幾個因素,包括離心力、大分子的大小形狀和密度、梯度的密度和粘度。離心結束時,大分子在空間上被密度分離。較大的大分子(高密度大分子)向底部沉積。較輕的(低密度的大分子)仍處於梯度的頂部。因此,分子以不同的帶分開。然後將這些帶分開,並從蔗糖中分離出特定的大分子。
在應用方面,這種方法被廣泛應用於DNA分子的分離。蔗糖梯度超速離心法常用於表徵蛋白質複合物的大小和組成。此外,該技術還可用於mRNA的部分純化。
什麼是蔗糖緩衝超速離心(sucrose cushion ultracentrifugation)?
蔗糖緩衝超速離心是另一種能夠分離大分子的技術。與蔗糖密度梯度超速離心不同,蔗糖緩衝超速離心使用不連續的密度梯度。蔗糖濃度從上到下依次遞增。在這項技術中,分離是通過將澄清的提取物放在離心管(所謂的蔗糖緩衝)中的小體積蔗糖溶液上來實現的。這樣可以在高速離心中更好地分離。當分子在蔗糖緩衝墊之間分離成一條帶時,可以收集並純化白色帶。此外,利用蔗糖緩衝法可以進一步去除雜質。蔗糖緩衝法允許60-70%的試管充滿樣品。因此,蔗糖緩衝法能夠處理更大體積的樣品。
蔗糖梯度離心(sucrose gradient)和蔗糖緩衝超速離心(sucrose cushion ultracentrifugation)的共同點
- 蔗糖梯度法和蔗糖緩衝超速離心法是分離大分子混合物的兩種技術。
- 在這兩種方法中,使用蔗糖梯度。
- 離心是兩種方法中的一個步驟。
- 在每種方法中,分子沉澱成一條帶或一條帶。
蔗糖梯度離心(sucrose gradient)和蔗糖緩衝超速離心(sucrose cushion ultracentrifugation)的區別
蔗糖梯度超速離心是一種在離心管中使用連續蔗糖梯度的技術,而蔗糖緩衝超速離心是一種使用不連續蔗糖梯度的技術。因此,這是蔗糖梯度法和蔗糖緩衝超速離心法的關鍵區別。
此外,蔗糖緩衝超速離心允許處理較大體積的樣品,而蔗糖梯度超速離心允許處理相對較小體積的樣品。
下圖列出了蔗糖梯度法和蔗糖緩衝超速離心法之間的更多差異。
總結 - 蔗糖梯度離心(sucrose gradient) vs. 蔗糖緩衝超速離心(sucrose cushion ultracentrifugation)
蔗糖梯度超速離心分離大分子使用連續的蔗糖梯度。相反,蔗糖緩衝超速離心法使用不連續的蔗糖梯度來分離混合物**定類型的顆粒。因此,這是蔗糖梯度法和蔗糖緩衝超速離心法的關鍵區別。蔗糖緩衝法可以收集形態完整的顆粒,因為它不會引起機械應力,不像蔗糖梯度超速離心,後者將分子壓碎到試管底部。此外,蔗糖緩衝超速離心比蔗糖梯度超速離心能夠處理更大體積的樣品。
引用
1Dijkstra,Jeanne,和Cees P.de Jager。“密度梯度離心法”,斯普林克,斯普林格,柏林,海德堡,1998年1月1日,可在這裡查閱。