主要區別
Southern印跡法與Western印跡法的主要區別在於,Southern印跡法是一種用於檢測給定樣本**定DN**段的技術,而Western印跡法則用於找出給定樣本中的特定蛋白質。
南方印跡法(southern blotting) vs. 免疫印跡法(western blotting)
吸墨術是科學家用來從混合物或樣本中分離不同型別分子的技術。在這項技術中,大分子如核酸(DNA和RNA)和蛋白質在混合物中透過凝膠板移動。在這裡,微小的粒子會比較大的粒子移動得更快。這些分子被壓在固定化膜的表面,固定化膜將分子轉移到膜上。根據對特定物質的檢測,有不同型別的印跡,即南方印跡法、北方印跡法和西方印跡法。Southern印跡法是一種用於檢測DNA的印跡法,而western印跡法用於發現蛋白質。Southern印跡法是由edwardm.Southern於1975年開發的。因此,它被稱為南方印跡。另一方面,西方印跡法是1979年由斯坦福大學喬治·斯塔克的小組開發的。這個名字是用來匹配南方印跡。Southern印跡法用於找出特定的DNA序列,而western印跡法用於找出特定的氨基酸或蛋白質序列。
比較圖
什麼是南方印跡法(southern blotting)?
Southern印跡法是edwinsouthern提出的最古老的印跡法,被稱為Southern印跡法。它用於找出給定樣本或混合物中的特定DNA序列。southern雜交過程中涉及的步驟包括電泳、轉移和特定序列的檢測。首先,在特定的限制性酶的幫助下,將DN**段化。然後透過凝膠電泳分離出所需的DN**段。這些片段在鹼性溶液的幫助下變性,例如NaOH等,以分離兩條DNA鏈。這些單鏈DN**段然後透過印跡法轉移到膜上。然後用標記探針處理這種膜結合的DNA。這種探針將附著在細胞膜DNA上的互補鏈上,這些互補鏈可以透過放射自顯影等方法觀察到。
什麼是免疫印跡法(western blotting)?
蛋白質印跡法是由斯坦福大學的georgestark小組發明的,用於識別蛋白質中的特定氨基酸序列。它也被稱為蛋白質印跡或免疫印跡。westernblotting的步驟是電泳、轉移和檢測特定的蛋白質。首先,使混合物均勻化。然後利用電泳分離出感興趣的分子。將這些分子轉移到膜上,用特異探針鑑定特異蛋白。
主要區別
- 一種用於在給定混合物中找出特定DNA序列的技術稱為southern印跡法,而用於找出給定混合物中蛋白質的特定氨基酸序列的技術稱為southern印跡法。
- Southern印跡法是由edwardm.Southern於1975年發展起來的,因此被稱為Southern印跡法。另一方面,西方印跡法是1979年由斯坦福大學喬治·斯塔克的小組開發的。
- Southern雜交是用來找出一個特定的DNA序列。相反,western blotting被用來找出特定的氨基酸或蛋白質序列。
- Southern印跡法的原理是雜交法的反面;western印跡法的原理是免疫檢測法或抗原抗體相互作用。
- 單鏈DNA或RNA在Southern印跡法中用作探針,在western印跡法中,一級和二級抗體用作探針。
- southern印跡採用瓊脂糖凝膠電泳,western印跡採用SDS-PAGE/聚丙烯醯胺凝膠分離蛋白質。
- 另一方面,Southern印跡遵循毛細管轉移程式,而western印跡遵循電遷移程式。
- 在Southern印跡法中,樣品需要變性,而在western印跡法中,樣品應處於其原始狀態。
- 另一方面,southern印跡法不涉及任何階梯式的阻斷,在western印跡法中,非特**抗**點在硝酸纖維素紙上藉助奶粉或牛血清白蛋白(BSA)阻斷。
- southern印跡法常用的標記方法有顯色染料法、放射標記法、熒游標記法等,而western印跡法常用的標記方法有熒游標記抗體法或放射標記法、顯色染料法或二氨基聯苯胺法等。
- southern印跡法的檢測方法有光照法、放射自顯影法和顏色變化法,而western印跡法的檢測方法是顏色變化和光照檢測等。
- Southern blotting用於DNA檢測、親子鑑定、DNA指紋鑑定、受害者識別、罪犯識別、傳染源識別、突變或基因重排等。反之,western blotting用於發現混合物中蛋白質的數量,檢測HIV、病毒和細菌的存在,檢測血清中的缺陷蛋白,作為皰疹、乙型肝炎、萊姆病、克-雅各布病等疾病的定量檢測方法。
結論
以上討論總結了southern印跡法是最古老的用於發現樣本**定DN**段的印跡技術,而western印跡法則是後者,用於識別特定氨基酸序列或特定蛋白質。