主要区别
Southern印迹法与Western印迹法的主要区别在于,Southern印迹法是一种用于检测给定样本**定DN**段的技术,而Western印迹法则用于找出给定样本中的特定蛋白质。
南方印迹法(southern blotting) vs. 免疫印迹法(western blotting)
吸墨术是科学家用来从混合物或样本中分离不同类型分子的技术。在这项技术中,大分子如核酸(DNA和RNA)和蛋白质在混合物中通过凝胶板移动。在这里,微小的粒子会比较大的粒子移动得更快。这些分子被压在固定化膜的表面,固定化膜将分子转移到膜上。根据对特定物质的检测,有不同类型的印迹,即南方印迹法、北方印迹法和西方印迹法。Southern印迹法是一种用于检测DNA的印迹法,而western印迹法用于发现蛋白质。Southern印迹法是由edwardm.Southern于1975年开发的。因此,它被称为南方印迹。另一方面,西方印迹法是1979年由斯坦福大学乔治·斯塔克的小组开发的。这个名字是用来匹配南方印迹。Southern印迹法用于找出特定的DNA序列,而western印迹法用于找出特定的氨基酸或蛋白质序列。
比较图
什么是南方印迹法(southern blotting)?
Southern印迹法是edwinsouthern提出的最古老的印迹法,被称为Southern印迹法。它用于找出给定样本或混合物中的特定DNA序列。southern杂交过程中涉及的步骤包括电泳、转移和特定序列的检测。首先,在特定的限制性酶的帮助下,将DN**段化。然后通过凝胶电泳分离出所需的DN**段。这些片段在碱性溶液的帮助下变性,例如NaOH等,以分离两条DNA链。这些单链DN**段然后通过印迹法转移到膜上。然后用标记探针处理这种膜结合的DNA。这种探针将附着在细胞膜DNA上的互补链上,这些互补链可以通过放射自显影等方法观察到。
什么是免疫印迹法(western blotting)?
蛋白质印迹法是由斯坦福大学的georgestark小组发明的,用于识别蛋白质中的特定氨基酸序列。它也被称为蛋白质印迹或免疫印迹。westernblotting的步骤是电泳、转移和检测特定的蛋白质。首先,使混合物均匀化。然后利用电泳分离出感兴趣的分子。将这些分子转移到膜上,用特异探针鉴定特异蛋白。
主要区别
- 一种用于在给定混合物中找出特定DNA序列的技术称为southern印迹法,而用于找出给定混合物中蛋白质的特定氨基酸序列的技术称为southern印迹法。
- Southern印迹法是由edwardm.Southern于1975年发展起来的,因此被称为Southern印迹法。另一方面,西方印迹法是1979年由斯坦福大学乔治·斯塔克的小组开发的。
- Southern杂交是用来找出一个特定的DNA序列。相反,western blotting被用来找出特定的氨基酸或蛋白质序列。
- Southern印迹法的原理是杂交法的反面;western印迹法的原理是免疫检测法或抗原抗体相互作用。
- 单链DNA或RNA在Southern印迹法中用作探针,在western印迹法中,一级和二级抗体用作探针。
- southern印迹采用琼脂糖凝胶电泳,western印迹采用SDS-PAGE/聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白质。
- 另一方面,Southern印迹遵循毛细管转移程序,而western印迹遵循电迁移程序。
- 在Southern印迹法中,样品需要变性,而在western印迹法中,样品应处于其原始状态。
- 另一方面,southern印迹法不涉及任何阶梯式的阻断,在western印迹法中,非特**抗**点在硝酸纤维素纸上借助奶粉或牛血清白蛋白(BSA)阻断。
- southern印迹法常用的标记方法有显色染料法、放射标记法、荧光标记法等,而western印迹法常用的标记方法有荧光标记抗体法或放射标记法、显色染料法或二氨基联苯胺法等。
- southern印迹法的检测方法有光照法、放射自显影法和颜色变化法,而western印迹法的检测方法是颜色变化和光照检测等。
- Southern blotting用于DNA检测、亲子鉴定、DNA指纹鉴定、受害者识别、罪犯识别、传染源识别、突变或基因重排等。反之,western blotting用于发现混合物中蛋白质的数量,检测HIV、病毒和细菌的存在,检测血清中的缺陷蛋白,作为疱疹、乙型肝炎、莱姆病、克-雅各布病等疾病的定量检测方法。
结论
以上讨论总结了southern印迹法是最古老的用于发现样本**定DN**段的印迹技术,而western印迹法则是后者,用于识别特定氨基酸序列或特定蛋白质。