南北方(southern northern)和蛋白质印迹(western blotting)的区别

Southern-Northern杂交与Western杂交的主要区别在于Southern杂交涉及DNA的鉴定,Northern杂交涉及RNA的鉴定,而Western杂交涉及蛋白质的鉴定。...

Southern-Northern杂交与Western杂交的主要区别在于Southern杂交涉及DNA的鉴定,Northern杂交涉及RNA的鉴定,而Western杂交涉及蛋白质的鉴定。

Southern、Northern和Western是三种用于检测样本**定DNA、RNA或蛋白质分子的印迹技术。在印迹过程中,大分子从凝胶转移到膜上,并与特定的核酸或抗体结合,有助于检测。

覆盖的关键领域

1.什么是Southern Blotting–定义,过程,应用2.什么是Northern Blotting–定义,过程,应用3.什么是Western Blotting–定义,过程,应用4.南-北和Western Blotting之间有什么相似之处-共同特征概述5.南-北和Western Blotting之间有什么不同-主要差异比较

关键术语

抗体,DNA,电泳,Northern印迹,RNA,蛋白质,Southern印迹,Western印迹

南北方(southern northern)和蛋白质印迹(western blotting)的区别

什么是南方杂交(southern blotting)?

Southern杂交是一种用于检测DNA混合物**定DNA序列的技术。Southern杂交的基本步骤如下。

电泳-根据凝胶电泳的大小,将DNA样本分成不同的条带。

转移-在转移过程中,硝酸纤维素膜与凝胶接触,DNA带通过毛细管作用移动到膜上。

特**序列的检测——将膜上的靶序列与被称为杂交探针的特**标记寡核苷酸序列杂交。杂交探针短,大小100-500bp,单链DNA分子。严格性,这取决于温度和盐浓度的杂交缓冲液,影响杂交。高温和低盐浓度定义的高严格性增加了杂交的特**,而低温和高盐浓度定义的低严格性降低了特**。

Difference Between Southern Northern and Western Blotting

Figure 1: Southern Blotting

Southern杂交的主要目的是检测样本中的特定DNA序列。这项技术被用于DNA指纹、亲子鉴定、被害人身份鉴定和刑事鉴定。它也有助于鉴定特定的基因,在限制性片段长度多态性(RFLP),突变和基因重排,遗传疾病和传染源的鉴定。

什么是northern印迹法(northern blotting)?

Northern杂交是一种用于检测RNA混合物**定RNA的技术。Northern印迹的基本步骤如下。

电泳-它根据大小将RNA样本分离成不同的带。

转移-通过毛细管作用,凝胶中的RNA带转移到膜上。

特定序列的检测-通过与由DNA组成的标记寡核苷酸探针杂交来检测目标RNA序列。

Main Difference - Southern Northern and Western Blotting

Figure 2: Northern Blotting

由于Northern印迹法可以识别样本中的特定RNA序列,因此可以用于基因表达的研究。它还可以帮助疾病诊断。

什么是蛋白质印迹(western blotting)?

westernblot是一种用于检测蛋白质混合物**定氨基酸序列的杂交技术。westernblot的基本步骤如下。

电泳-通过SDS-PAGE根据大小将单个蛋白质分离成条带。

转移-凝胶中的蛋白质带通过印迹转移到膜上。

特**蛋白的检测——分离蛋白的膜被培养成一种只与特定蛋白质结合的原抗体。第二抗体,用辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶等酶标记,用于检测原抗体。当与底物孵育时,酶作用可视化抗体与膜上特定区域的结合。

Southern Northern and Western Blotting

Figure 3: Western Blotting

Western印迹也称为蛋白质印迹或免疫印迹。它可以识别样本中的蛋白质数量、血清中是否存在细菌和病毒以及血清中是否存在HIV抗体。它还可以检测有缺陷的蛋白质。此外,westernblotting是乙型肝炎、克雅克氏病、莱姆病和疱疹的最终检测方法。

southern-northern杂交与western杂交的相似性

  • Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是三种用于鉴定样品**定类型大分子的印迹技术。
  • 印迹技术的三个步骤是电泳、转移和检测。
  • 每一种技术都需要变性和用过量的相应大分子封闭。
  • 每种技术都在生物技术和医学上有应用。

南北方(southern northern)和蛋白质印迹(western blotting)的区别

定义

Southern杂交是指鉴定DNA特定序列的一种方法,Northern杂交指的是Southern杂交程序的一种改进,用于通过与互补DNA杂交来检测RNA的特定序列;Western杂交指的是用于识别蛋白质**定氨基酸序列的杂交程序。

编制人

Southern印迹技术是由edwardm。Northern blot是在1975由Alwine和他的同事在1979开发的,Western blot是由George Stark集团于1979在斯坦福大学开发的。

检测到的分子

Southern杂交检测特定的DNA序列,Northern杂交检测特定的RNA序列,Western杂交检测特定的蛋白质。

凝胶电泳

Southern杂交涉及琼脂糖凝胶电泳,Northern杂交涉及变性甲醛琼脂糖凝胶,Western杂交涉及SDS-PAGE。

印迹法

南方和北方的印迹都涉及毛细血管转移,而西方的印迹则涉及电转移。

探头

Southern杂交使用DNA探针,Northern杂交使用cDNA探针,Western杂交使用一级和二级抗体。

应用

Southern杂交用于鉴定特定的基因序列和DNA指纹。Northern杂交用于基因表达分析,Western杂交用于疾病诊断。

结论

Southern印迹识别特定的DNA序列,Northern印迹识别特定的RNA序列,Western印迹识别特定的蛋白质序列。因此,三种印迹技术的主要区别在于它们检测到的大分子的类型。

引用

1.“南方杂交:原理、程序和应用-”《在线生物学笔记》,2017年12月4日, 此处提供2。Kochunni、Deena T和Jazir Haneef。”Northern杂交:原理、程序和应用, 可在此处获取3。”Western Blotting技术:原理、程序和应用——《生物学在线笔记》,2017年12月4日, 此处提供 2.Kochunni、Deena T和Jazir Haneef。”Northern杂交:原理、程序和应用,  3.“Western Blotting技术:原理、程序和应用-”《生物学在线笔记》,2017年12月4日, 

  • 发表于 2021-06-30 18:31
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  • 分类:科学

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