主要区别-北方与南方与西方印迹法

检测DNA、RNA和蛋白质的特定序列对于分子生物学的各种类型的研究是必不可少的。凝胶电泳是一种根据DNA、RNA和蛋白质的大小进行分离的技术。从凝胶图谱中，特定的DNA序列、RNA序列或蛋白质是通过被称为印迹和带标记探针杂交的特殊技术来检测的。有三种不同类型的印迹方法，即南方，北方和西方。南北印迹法和西方印迹法的主要区别在于它从样本中检测到的分子类型。Southern印迹法是一种从DNA样本中检测特定DNA序列的方法。Northern印迹法是一种从RNA样本中检测特定RNA序列的技术。Western blotting是一种从蛋白质样本中检测特定蛋白质的方法。

内容1。概述和主要区别2。什么是南方污点。什么是北方污渍4。什么是免疫印迹5。并列比较-北方与南方与西方印迹6。摘要

什么是南方印迹法(southern blotting)？

Southern印迹技术是由E.M.Southern于1975年开发的，用于从DNA样本中鉴定特定的DNA序列。这是第一个在分子生物学中引入的印迹技术。它可以检测DNA中的特定基因、DNA中的特定片段等。具体如下。

1. 从样品中分离出DNA，用限制性内切酶消化。
2. 用琼脂糖凝胶电泳分离样品。
3. 用碱性溶液将凝胶中的DN**段变性成单链。
4. 单链DNA通过毛细管转移到硝化纤维滤膜上。
5. 转移的DNA被永久固定在膜上。
6. 膜上的固定DNA与标记探针杂交。
7. 未结合的DNA通过洗涤从膜上洗掉。
8. X射线胶片暴露在薄膜上，并制备放射自显影。

Southern印迹法应用于分子生物学的不同方面。它在RFLP定位、法医学研究、基因表达中的DNA甲基化、遗传疾病中突变基因的检测、DNA指纹图谱等方面都很有用。

图01：南方印迹技术

什么是北方印迹法(northern blotting)？

Northern印迹法是一种从样本中检测特定RNA序列或mRNA序列以研究基因表达的方法。这项技术是由Alwine、Kemp和Stark于1979年开发的。它不同于南方和西方的印迹技术，由于几个步骤。然而，这种技术也可以通过凝胶电泳、印迹、与特定标记探针杂交和检测来实现。Northern印迹技术如下。

1. 从样品中提取RNA，用凝胶电泳分离。
2. RNA从凝胶转移到一个吸墨膜上并固定。
3. 用从cDNA或RNA制备的标记探针（探针与样本中的特定序列互补）处理膜。
4. 探针与膜一起孵育，与特定序列结合。
5. 未绑定的探针被冲洗掉。
6. 杂交片段由放射自显影检测。

Northern杂交是检测和定量杂交mRNA、研究RNA降解、评价RNA半衰期、检测RNA剪接、研究基因表达等方面的重要工具。

图02：北方印迹法

什么是免疫印迹法(western blotting)？

免疫印迹法是一种利用标记抗体从蛋白质混合物中检测特定蛋白质的方法。因此，western blot也称为免疫印迹。这项技术由Towbin等人于1979年引入，现在已在实验室进行常规蛋白质分析。步骤如下。

1. 从样本中提取蛋白质
2. 蛋白质通过聚丙烯酰胺凝胶电泳按其大小进行分离
3. 通过电穿孔将分离的分子转移到PVDF膜或硝化纤维膜上
4. 由于与抗体非特**结合，膜被阻断
5. 转移的蛋白质与一级抗体（酶标抗体）结合。
6. 清洗膜以去除非特**结合的初级抗体
7. 结合抗体是通过添加底物和检测所形成的有色沉淀物来检测的

Western印迹法用于检测人血清样本中的抗HIV抗体。westernblot还可作为乙型肝炎感染的确证试验和疯牛病的确诊试验。

图03：免疫印迹法

南北(northern southern)和免疫印迹法(western blotting)的区别

总结 - 北方的(northern) vs. 南方的(southern)

印迹法是一种从样品中鉴定特定DNA、RNA或蛋白质的特殊技术。有三个独立的印迹程序，即北方，南方和西部，以检测特定类型的分子。Northern印迹技术是一种从RNA混合物中检测特定RNA序列的技术。Southern印迹技术能够从DNA样本中检测出特定的DNA序列，而western印迹技术则用于从蛋白质混合物中识别特定的蛋白质。

参考文献1。吉本斯，珍妮。“免疫印迹：蛋白质转移概述”，《北美医学科学杂志》。Mednow Publicati***&Media Pvt Ltd，2014年3月。网状物。2017年3月27日。Brown，T.“南方印迹法”，免疫学的最新研究方案。U、 美国国家医学图书馆，2001年5月。网状物。2017年3月27日。他，山L.“北方斑点”，酶学方法。U、 美国国家医学图书馆，2013年。网状物。2017年3月27日