瞬变(transient)和稳定转染(stable transfection)的区别
转染是利用化学或物理方法对真核细胞进行基因转移的过程。转染可分为瞬时转染和稳定转染两大类。在瞬时转染过程中,感兴趣的基因无法与宿主基因组整合,在宿主内短暂表达,而在稳定转染中,感兴趣基因与宿主基因组整合并在数代中长期维持。这是瞬时转染和稳定转染的关键区别。在这两种情况下,转染成功,基因得到表达。
内容1。概述和主要区别2。什么是短暂的转染。什么是稳定转染4。并行比较-瞬时转染与稳定转染5。摘要
什么是瞬时转染(transient transfection)?
转染是将基因导入真核细胞的重要手段。在这两种类型的转染中,瞬时转染是一种常见的基因转移方式。通过载体,外源基因在宿主细胞内转化。一旦外源DNA进入宿主细胞,它有两种选择。它既可以与宿主基因组整合并复制,也可以留在体内而不整合到基因组中。瞬时转染表现出**基因的暂时性表达,而不整合到宿主基因组中。基因表达并产生编码的蛋白质直到细胞分裂。然而,由于无法整合,它无法复制并进入后代。这种类型的转染在短时间内是成功的。在细胞分裂过程中或由于其他因素,外源DNA会发生降解。当外源DNA以高度卷曲的DNA形式出现时,显示瞬时转染。
什么是稳定转染(stable transfection)?
稳定转染表明外源基因成功整合到宿主基因组中。一旦外源DNA进入宿主细胞,部分外源DNA与宿主基因组整合并成为宿主基因组的一部分。因此,当宿主基因组复制时,外来DNA也会复制并传递给后代。这种类型的转染是复杂和罕见的。然而,由于稳定转染到基因组中,这种特性可以持续数代。
稳定的转染是一个困难的过程,需要有效地将DNA和细胞获得的外源DNA导入其基因组。因此,线性DNA比环状DNA更有利于稳定的转染。然而,稳定的转染率约为104个转化细胞中的一个。通过选择性标记的共转染和在培养基上进行人工选择,可以观察到稳定的转染。
瞬变(transient)和稳定转染(stable transfection)的区别
瞬时转染与稳定转染 | |
外源DNA不能整合到宿主基因组中。 | 外源DNA与宿主基因组整合成为宿主基因组的一部分。 |
主机内的复制 | |
瞬时转染的基因不会在宿主内复制。所以基因不会传给下一代。 | 基因在宿主内复制并传给后代。 |
基因表达的持续时间 | |
基因在一个有限的时间段内被表达出来,然后就被破坏了。 | 基因成为基因组的一部分,并在这一代人中长期表达。 |
使用 | |
这对于研究基因或基因产物短期表达的影响是有用的。 | 这对于长期研究基因表达的影响是有用的。 |
转染检测 | |
基因是表达的,通过**报告基因可以很容易地检测到。 | 通过**一个可选择的标记物并通过人工选择在培养基上进行选择,可以很容易地检测到稳定的转染。 |
发生和过程 | |
瞬时转染是常见的,并不复杂。 | 稳定的转染很少发生,而且操作复杂。 |
DNA的性质 | |
高度超螺旋DNA适合于瞬时转染。 | 线性DNA适合稳定转染。 |
应用 | |
这是用来研究基因敲除或沉默与抑制核糖核酸,蛋白质生产小规模 | 这是用于蛋白质生产的大规模、长期的药理学研究、基因治疗、长期基因调控机制的研究 |
总结 - 瞬变(transient) vs. 稳定转染(stable transfection)
瞬时转染和稳定转染是基因通过非病毒载体系统转入真核细胞的两种类型的转染。外源DNA在瞬时转染时不与宿主基因组整合,而稳定转染时与宿主基因组整合。环状螺旋DNA显示为瞬时转染,而线性DNA更倾向于稳定转染。这就是瞬时转染和稳定转染的区别。然而瞬时转染比稳定转染更为常见和容易。但两者之间的选择取决于基因转移的目的和研究项目的持续时间。