主要差异克隆载体(main difference cloning vector) vs. 表达载体(expression vector)

克隆载体和表达载体是重组DNA技术中用来将外源DN**段导入靶细胞的两种载体。克隆和表达载体都包括复制的起源、独特的限制性位点和载体序列中的选择标记基因。由于复制源的存在，克隆载体和表达载体都具有自我复制能力。克隆载体可以是质粒、co**ids或噬菌体。克隆载体与表达载体的主要区别在于，克隆载体是用来将外源DN**段导入宿主细胞的，而表达载体是一种克隆载体，它含有合适的表达信号，基因表达量最大。

覆盖的关键领域

1.什么是克隆载体-定义、类型、用途2。什么是表达式向量-定义、类型、用途3。克隆载体和表达载体之间有什么相似之处？共同特征概述4。克隆载体和表达载体的区别是什么？关键区别的比较

关键词：噬菌体、克隆载体、Co**ids、DNA、DNA技术、表达结构、表达载体、复制源、启动子区、重组RNA、质粒、限制性位点、选择标记

什么是克隆载体(a cloning vector)？

克隆载体作为DNA分子的载体。所有克隆载体都有四个特点：

• 它们与携带的外源DN**段一起具有自我复制能力
• 它们包含几个限制性位点，在载体中只存在一次
• 它们携带一个选择标记，通常以抗生素抗性基因的形式存在，而这在宿主基因组中是不存在的
• 它们相对容易从宿主细胞中恢复。

有许多经典的克隆载体的选择，如质粒，噬菌体和co**ids取决于目的。克隆载体的选择取决于**和应用程序的大小。

质粒

质粒是一种天然存在的染色体外双链DNA分子，能够在细菌细胞内自主复制。质粒中**片段的大小限制为10kb。质粒作为克隆载体用于亚克隆和下游操作、cDNA克隆和表达分析。pBR322是第一个被用于重组DNA技术的基因工程质粒之一。pBR322质粒如图1所示。

Figure 1: pBR322

噬菌体

噬菌体来源于噬菌体lambda，其中噬菌体lambda的cos位点允许将其包装成噬菌体头部。载体DNA在宿主细胞内的复制最终会导致细胞裂解。可**噬菌体载体的**物大小为5-12kb。噬菌体载体用于基因组DNA克隆、cDNA克隆和表达文库。

黏粒

Co**ids是一种含有噬菌体lambda的cos位点的质粒。噬菌体lambda的cos位点允许将其包装成噬菌体头部。虽然它是一个质粒，但在宿主细胞内复制co**ids可能不会像在噬菌体载体中那样溶解细胞。可克隆到co**id载体的**片段大小为35-45kb。Co**id载体用于构建基因组文库。

由于哺乳动物基因的大小通常大于100kb，用传统的克隆载体无法克隆完整的基因序列。这个问题可以通过将宿主细胞染色体的特性模拟成载体来解决。这种载体称为人工染色体载体。BACs（细菌人工染色体载体）、YACs（酵母人工染色体载体）和MACs（哺乳动物人工染色体载体）是人工染色体载体的类型。

bacs公司

细菌人工染色体载体是基于大肠杆菌F因子质粒构建的。可克隆到BAC载体的**片段大小为75-300kb。BAC载体用于大基因组的分析。

雅克

酵母人工染色体载体是基于酿酒酵母着丝粒、端粒和其他自主复制序列。可克隆到YAC载体的**大小为100-1mb。YAC载体用于大基因组的分析。

苹果电脑

哺乳动物人工染色体载体是以哺乳动物着丝粒、端粒和复制起源为基础的。Mac中的**大小为100 kb到1 Mb。mac被用于动物生物技术和人类基因治疗。

什么是表达式向量(an expression vector)？

表达载体又称为表达载体，是一种质粒。通过表达载体将特殊基因导入宿主细胞，其中利用细胞转录和翻译机制通过表达载体促进转化基因的表达。表达载体包含调控序列，例如增强子和启动子区域，其导致有效的基因表达。在宿主细胞内表达一种特定的蛋白质如胰岛素后，应从宿主细胞的蛋白质中纯化该产物。因此，引入的蛋白质要么用组氨酸（His标记）或任何其他蛋白质标记。为了获得导入基因在宿主细胞内的高效表达，应将以下表达信号导入到表达载体中。

• **强启动子。
• **强终止密码子。
• 启动子区域和克隆基因之间有相当大的距离。
• 转录起始序列的**。
• **翻译起始序列。

Figure 2: pGEX-3X

克隆载体与表达载体的相似性

• 克隆和表达载体都用于将外源DN**段导入被称为宿主细胞的靶细胞。

• 克隆载体和表达载体都具有相同的特征，如复制起源、独特的限制性位点和载体序列中的选择标记基因。

• 克隆载体和表达载体都能在宿主细胞内独立复制。

克隆载体(cloning vector)和表达载体(expression vector)的区别

定义

克隆载体：克隆载体是在宿主细胞内稳定存在的一小块DNA。它被用来将基因导入细胞，同时获得大量**物的拷贝。

表达载体：表达载体是将特定基因导入靶细胞，并控制细胞机制产生相关基因产物的质粒。

角色

克隆载体：克隆载体用于获得大量**DN**段的拷贝。

表达载体：表达载体用于获得**的DN**段的基因产物，蛋白质或RNA。

类型

克隆载体：克隆载体可以是质粒、co**ids、噬菌体、BACs、YACs或MACs。

表达载体：表达载体是质粒载体。

向量的特征

克隆载体：克隆载体包括复制起点、唯一限制位点和可选择标记。

表达载体：表达载体除具有克隆载体的典型特征外，还包括载体中的增强子、启动子区、终止密码子、转录起始序列和翻译起始序列。

结论

克隆载体和表达载体在重组DNA技术中被广泛应用于将外源DN**段导入靶细胞。克隆载体和表达载体都能在宿主细胞内自我复制。克隆载体通常用于将外源基因导入靶细胞，同时获得所导入基因的大量拷贝。表达载体用于获得基因产物，即宿主细胞内导入基因的蛋白质或RNA。大多数重组蛋白如胰岛素是通过表达载体产生的。克隆载体和表达载体的主要区别在于各自在重组DNA技术中的应用。

引用

1.“克隆载体”，基因的克隆和分子分析。N.p.，N.d.网站。这里有。2017年6月18日。 2.“穿梭载体和表达载体”，无限。《无边无际》，2016年5月26日。这里有。2017年6月18日。 2.“穿梭载体和表达载体”，无限。《无边无际》，2016年5月26日。