重组DNA技术是将两个物种的DNA连接起来，**宿主体内，产生新的基因组合的一种方法。生产重组DNA的实验室过程是分子克隆。PCR复制**质粒的所需DN**段。将重组质粒转化到宿主生物体中以产生重组质粒的大量拷贝。细菌是用于重组DNA技术的宿主生物，使用细菌作为宿主有多种原因。

覆盖的关键领域

1.什么是重组DNA技术-定义，过程步骤2.为什么在重组DNA技术中使用细菌-使用细菌作为宿主的原因

关键词：细菌、分子克隆、生长速度、重组DNA技术、PCR、质粒、筛选

什么是重组dna技术(recombinant dna technology)？

重组DNA技术是一种分子生物学技术，用于产生具有特定生物体所需特性的重组DNA分子。分子克隆技术是利用PCR技术产生大量的重组DNA的实验室技术。分子克隆的过程包括以下七个步骤。

1. 宿主生物和克隆载体的选择——宿主生物主要是细菌。克隆载体的选择取决于宿主的选择、外源DN**段的大小和表达水平。
2. 载体DNA的制备-用限制性内切酶消化克隆载体，使其与外源DN**段相容。
3. 待克隆DNA的制备-可通过PCR扩增待克隆的所需DN**段，并用限制性内切酶消化以产生与克隆载体相容的末端。
4. 重组DNA的产生-通过DNA连接酶处理，将消化的克隆载体和PCR片段连接起来。
5. 将重组DNA导入宿主-重组的DNA分子转化为细菌以获得大量的拷贝。
6. 转化生物的选择-一个可选择的标记，如抗生素抗性，可用于选择培养中的转化细菌。
7. 筛选具有所需DNA的克隆-蓝白筛选系统、PCR、限制性片段分析、核酸杂交、DNA测序和抗体探针可用于筛选具有所需DN**段的克隆。

重组DNA技术的步骤如图1所示。

Figure 1: Recombinant DNA Technology

为什么细菌被用于重组dna技术

细菌成为生产大量重组DNA拷贝的“工厂”。在重组DNA技术中使用细菌作为宿主有几个原因。他们是；

1. 细菌细胞在实验室里易于生长、维护和操作。细菌的生长要求很简单，可以在培养皿中提供。在培养箱中可以很容易地提供生长条件。它们也能耐受细胞内的外来DNA。

1. 它们繁殖迅速。由于细菌是小型有机体，它们的生长速度比复杂的细胞类型快。它们的细胞分裂率很高。

1. 被称为质粒的细菌的染色体外成分可以**纵，并且可以作为重组DNA进入细胞的载体。质粒可以从细菌中分离出来，**外源DNA，然后转化回细菌。

1. 克隆的重组质粒可以很容易地从细菌中分离出来。质粒DNA可以通过简单的实验室过程通过细菌细胞裂解分离出来。

细菌在重组DNA技术中的应用如图2所示。

Figure 2: Use of Bacteria in Recombinant DNA Technology

E。由于以下几个原因，大肠杆菌是广泛使用的细菌类型：

• E。大肠杆菌基因组研究得很好，而且相对简单。它只携带4400个基因。此外，它在一生中保持单倍体。因此，利用E。大肠杆菌作为一个单一的基因拷贝被定点突变所掩盖。
• E。大肠杆菌很高。它在20分钟内迅速复制。因此，很容易获得对数相位（中间至最大密度）。
• 许多E。 大肠杆菌菌株在合理的卫生条件下是安全的。
• 利用E。 大肠杆菌。

结论

重组DNA技术被用来向生物体引入所需的特性。细菌作为重组DNA技术的模型，由于其生长和操作简单、细胞分裂快、操作简单、易于选择和筛选转化子等优点而被广泛应用。

引用

1.格里菲斯，安东尼JF。”基因分析导论。第7版，美国国家医学图书馆，1970年1月1日，可在这里查阅。2.菲利普斯，特里莎。”六大理由。大肠杆菌用于基因克隆。 2.菲利普斯，特里莎。”六大理由。大肠杆菌用于基因克隆，