重组DNA是由两个或两个以上物种的DNA合成的一种人工DNA。**重组DNA的过程被称为分子克隆。分子克隆的基本步骤包括分离DNA、切割DNA、连接DNA和扩增重组DNA。将感兴趣的基因**载体，作为感兴趣基因的载体分子。该载体与相关基因一起被称为重组DNA。限制性内切酶在基因克隆中的主要作用是切割DNA。限制性内切酶的一个关键特性是能够在特定的靶点切割DNA。这允许产生所需的DN**段用于连接目的。

覆盖的关键领域

1.什么是限制性内切酶-定义、性质、作用2.限制性内切酶如何用于**重组DNA-基因克隆，限制性内切酶在基因克隆中的应用

关键词：切割DNA，基因克隆，目的基因，分子克隆，重组DNA技术，限制性内切酶，载体

什么是限制性内切酶(restriction enzymes)？

限制性内切酶是一种能识别被称为限制性位点的短而特异的DNA序列并在该位点切割DNA的内切酶。它们是一种由细菌产生的生化剪刀。限制性内切酶保护细菌免受噬菌体的侵害。这些酶是从细菌中分离出来的，用于在实验室切割DNA。限制性内切酶的作用如图1所示。

Figure 1: Action of HindIII

限制性内切酶在精确位置切割DNA的能力使研究人员能够从基因组DNA中分离出含有片段的基因。这些片段可以**载体中产生重组DNA分子。

限制性内切酶是如何用来**重组dna的

重组DNA是由两个或两个以上物种的DNA组成的DNA分子。它主要包括来自供体物种的感兴趣的基因和携带感兴趣的基因到宿主细胞的载体。生产重组DNA分子的主要步骤是DNA分离、限制性内切酶消化、将感兴趣的基因连接到载体上以及在宿主细胞内扩增重组DNA分子。整个过程被称为分子克隆。分子克隆如图2所示。

Figure 2: Molecular Cloning

感兴趣的基因首先以基因组DNA的形式从生物样品中分离出来，也可以通过PCR进行扩增。有时，感兴趣的基因可能存在于载体中。为了**到适合将感兴趣的基因携带到宿主细胞的载体中，应该将其从母体分子中切断。由于限制性内切酶通过识别限制性位点来精确切割DNA，因此它们可以用于此目的。感兴趣的基因和载体可以用相同的限制性内切酶消化，或者感兴趣的基因的每一端可以用两种限制性内切酶消化。这种消化产生了与载体相关基因连接的相容末端。用两种限制性内切酶进行消化，可以在所需的方向连接片段。连接后，产生的重组DNA分子转化为细菌产生大量的拷贝。

结论

限制性内切酶是在被称为限制性位点的特定位置切割DNA的内切酶。限制性内切酶的特性可用于通过在精确位置切割DNA来产生重组DNA分子。重组DNA通常包含一个**载体的感兴趣的基因。

引用

1.“限制性内切酶的定义”MedicineNet，可在此处获得。格里菲斯，安东尼JF。”基因分析导论。第7版，美国国家医学图书馆，1970年1月1日，可在这里查阅。 2.格里菲斯，安东尼JF。”基因分析导论。第7版，美国国家医学图书馆，1970年1月1日，