如何产生的基因组文库(a genomic library produced)

基因组库是包含特定生物体总染色体DNA的两种DNA库之一。在基因组库中，不同的DNA插入物存储在一个相同载体的群体中。为了制备一个特定生物体的基因组库，基因组DNA应该从生物体中分离出来。限制酶在特定的DNA序列中消化基因组DNA，从而产生基因组DNA片段。每个片段可能包含一个或两个基因。这些片段被插入到特定类型的载体中，并转化为宿主细菌，以制备DNA克隆。...

基因组库是包含特定生物体总染色体DNA的两种DNA库之一。在基因组库中，不同的DNA**物存储在一个相同载体的群体中。为了制备一个特定生物体的基因组库，基因组DNA应该从生物体中分离出来。限制酶在特定的DNA序列中消化基因组DNA，从而产生基因组DN**段。每个片段可能包含一个或两个基因。这些片段***到特定类型的载体中，并转化为宿主细菌，以制备DNA克隆。

覆盖的关键领域

1.什么是基因组文库-定义，事实2.基因组文库是如何产生的-程序，效价，筛选

关键词：基因组文库，效价，限制性消化，筛选

什么是基因组文库(a genomic library)？

基因组文库是一组DNA克隆，代表特定生物体的全部DNA内容。DNA克隆在微生物中通过复制繁殖。基因组文库允许研究人员从文库中分离出感兴趣的DN**段进行研究。基因组文库是全基因组测序的重要组成部分。

基因组文库是如何产生的

基因组文库的制备步骤如下所述。

基因组DNA的提取与纯化
用特定的限制性内切酶消化基因组DNA–这可能会产生一组大小相似的DN**段。每个片段可能包含一个或两个基因组基因。
DN**段***到特定类型的载体中——载体被同一种限制性内切酶消化，然后将**物连接到载体中。载体的选择取决于基因组的大小。向量容量如下所示。

表1：媒介容量

向量类型	**大小
质粒	10 kb
噬菌体lambda	20 kb
粘粒	45 kb
噬菌体P1	70-100 kb
P1人工染色体（PAC）	130-150 kb
细菌人工染色体（BAC）	120-300 kb
酵母人工染色体（YAC）	250-2000 kb

4.转化为宿主-在大多数情况下，宿主是细菌或酵母。在宿主的复制过程中形成了特定DN**段的克隆。

Figure 1: Genomic Library Preparation

文库效价的测定

该文库的效价使研究人员能够了解样本中有多少转化的宿主细胞。它是通过稀释转化的细胞和计算每体积的细胞数来实现的。

筛选库

筛选允许从文库中分离特定的DN**段。主要有两种方法，一种是直接选择重组子，另一种是检测表达。直接选择可以通过PCR和菌落杂交进行。

结论

基因组文库是一组DN**段的集合，这些片段代表了特定生物体基因组中的全部DNA含量。它是通过将基因组的片段DNA**载体中，并将重组分子转化到宿主细胞中进行繁殖而产生的。

引用

1.库马尔，Chinnu S.“基因组文库。” LinkedIn幻灯片，2015年10月4日，点击此处。

发表于 2021-06-30 14:18
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分类：科学

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