温暖的(warm)和冷胰蛋白酶化(cold trypsinization)的区别

温胰蛋白酶和冷胰蛋白酶的主要区别在于,温胰蛋白酶参与组织与温胰蛋白酶在36.50℃的孵育°而冷胰蛋白酶化则是在4℃时将组织浸泡在冷胰蛋白酶中°然后在36.50℃孵育°C此外,在温胰蛋白酶作用下,对细胞的损伤较高,而冷胰蛋白酶作用使温胰蛋白酶对组织的长期影响最小化。...

温胰蛋白酶和冷胰蛋白酶的主要区别在于,温胰蛋白酶参与组织与温胰蛋白酶在36.50℃的孵育°而冷胰蛋白酶化则是在4℃时将组织浸泡在冷胰蛋白酶中°然后在36.50℃孵育°C此外,在温胰蛋白酶作用下,对细胞的损伤较高,而冷胰蛋白酶作用使温胰蛋白酶对组织的长期影响最小化。

温、冷胰蛋白酶化是胰蛋白酶化的两种技术,是一种酶解原代细胞培养中使用的组织的方法。在这里,胰蛋白酶是一种蛋白质分解酶,它分解了负责粘附细胞的蛋白质。

覆盖的关键领域

1.什么是温胰蛋白酶化-定义、方法、重要性2.什么是冷胰蛋白酶化-定义、方法、重要性3.温胰蛋白酶化和冷胰蛋白酶化的相似之处是什么-共同特征概述4.温胰蛋白酶化和冷胰蛋白酶化的区别是什么-主要区别的比较

关键术语

粘附蛋白、冷胰蛋白酶化、酶解聚、原代细胞培养、胰蛋白酶、温胰蛋白酶化

温暖的(warm)和冷胰蛋白酶化(cold trypsinization)的区别

什么是温胰蛋白酶化(warm trypsinization)?

温胰蛋白酶法是两种胰蛋白酶法中的一种,用于组织的酶解,同时为原代细胞培养做准备。它直接使用温度为36.50的温胰蛋白酶°C表示分解。首先,切碎的组织用DBS(解剖基础盐溶液)洗涤,然后加入温胰蛋白酶烧瓶。将分离的细胞置于上清液中,每隔30分钟搅拌一次烧瓶中的内容物,以回收分离的细胞。然后,将新鲜胰蛋白酶添加到混合物中。而且,这个过程可以持续3-4小时,同时回收分离的细胞。最后,可以通过离心从混合物中去除胰蛋白酶。

Difference Between Warm and Cold Trypsinization

Figure 1: Warm Trypsinization

此外,温胰蛋白酶是最有效的细胞收获方法,因为它直接使用温胰蛋白酶。而且,这个过程可以在几个小时内完成。然而,由于温胰蛋白酶的不利影响,活细胞的产量较少。

什么是冷胰蛋白酶化(cold trypsinization)?

冷胰蛋白酶化是胰蛋白酶化的第二种方法。它的效率较低,但能产生大量的活细胞。冷胰蛋白酶消化法的缺点之一是完成程序所需的时间。通常,制备的组织首先在4℃用冷胰蛋白酶浸泡°约6-24小时。然后,回收的组织与残余胰蛋白酶在36.50℃下孵育°20-30分钟。反复移液有助于分散分离的细胞。

Main Difference - Warm vs Cold Trypsinization

Figure 2: Cold Trypsinization

然而,如前所述,在这种方法中,由于长时间暴露于温胰蛋白酶而导致细胞受损的风险是最小的。因此,这种方法显示了培养中细胞活力的提高。此外,由于离心分离的空隙,该方法适用于常规实验室。然而,这种方法的主要缺点是不能同时用于大量组织。

温胰蛋白酶和冷胰蛋白酶的相似性

  • 温胰蛋白酶法和冷胰蛋白酶法是利用胰蛋白酶对细胞培养中粘附蛋白进行酶解的两种胰蛋白酶法。
  • 这两种方法都可以在为原代细胞培养准备组织时使用。
  • 此外,两种方法都使用温度为36.50的温胰蛋白酶°在某个时刻。
  • 此外,它们有助于分离细胞。

温暖的(warm)和冷胰蛋白酶化(cold trypsinization)的区别

定义

温胰蛋白酶化是指两种胰蛋白酶化方法之一,涉及在36.50℃下用胰蛋白酶孵育组织°C然后通过离心去除胰蛋白酶,而冷胰蛋白酶化是指在4℃下用胰蛋白酶浸泡所涉及的另一种胰蛋白酶化方法°C,然后在36.50℃下与胰蛋白酶孵育°C因此,这是温胰蛋白酶和冷胰蛋白酶的主要区别。

使用温胰蛋白酶(36.50°(三)

温、冷胰蛋白酶化的另一个主要区别是,在温胰蛋白酶作用下,组织用温胰蛋白酶处理3-4小时,而组织与温胰蛋白酶孵育20-30分钟。

离心

离心是温胰蛋白酶法和冷胰蛋白酶法的另一个区别。在温胰蛋白酶法中,离心是必要的,以去除样品中的胰蛋白酶,而在冷胰蛋白酶法中,离心是不需要的。

有效性

另外,温胰蛋白酶化更有效,而冷胰蛋白酶化效果较差。

重要性

此外,它们的意义是温胰蛋白酶化和冷胰蛋白酶化的另一个区别。温胰蛋白酶化可引起组织细胞损伤,而冷胰蛋白酶化可消除温胰蛋白酶化的不利影响。

活细胞产量

活细胞的产量是温胰蛋白酶法和冷胰蛋白酶法的另一个区别。温胰蛋白酶法的活细胞产量较低,而冷胰蛋白酶法的活细胞产量较高。

时间

此外,温胰蛋白酶化需要较少的时间来完成这个过程,而冷胰蛋白酶化需要更多的时间。

应用

此外,温胰蛋白酶用于含有细胞外基质和纤维结缔组织的组织,而冷胰蛋白酶用于胚胎**等软组织。

结论

温胰蛋白酶消化法是一种胰蛋白酶消化法,使用温度为36.50℃的温胰蛋白酶°C处理组织以降解粘附蛋白。虽然它是一种有效的酶分解组织的方法,但由于热胰蛋白酶的不利影响,它产生的活细胞数量较少。相比之下,冷胰蛋白酶化是第二种胰蛋白酶化方法,包括在4℃用冷胰蛋白酶浸泡组织°C与温胰蛋白酶孵育前。这种方法效率较低,但能产生大量的活细胞。因此,温胰蛋白酶和冷胰蛋白酶的主要区别在于温胰蛋白酶的使用和每种方法的重要性。

引用

1. “胰蛋白酶化。” Scribd,Scribd,这里有。

  • 发表于 2021-07-01 14:12
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  • 分类:科学

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