1型、2型和3型限制性内切酶的主要区别在于,1型和2型限制性内切酶在一个大型酶复合体中同时具有限制性和甲基化酶活性,而2型限制性内切酶具有独立的限制性和甲基化酶活性。此外,限制性内切酶1型和限制性内切酶3型在限制性内切酶识别位点的特定位点上切割DNA,而限制性内切酶1型和限制性内切酶3型在限制性内切酶识别位点的特定位点上切割DNA。
1型、2型和3型限制性内切酶是五种限制性内切酶中的三种,负责在分子内的特定位点切割DNA,称为限制性识别位点。一般来说,它们是一大类主要由原核生物产生的核酸内切酶。
1.什么是限制性内切酶类型1–定义、结构、功能2。什么是限制性内切酶2型-定义,结构,功能3。什么是限制性内切酶类型3-定义,结构,功能4。限制性内切酶类型1、2和3之间有什么相似之处——共同特征概述5。限制性内切酶类型1、2和3之间的区别是什么?关键区别的比较
内切酶,限制性内切酶1、2和3型,限制性识别位点
限制性内切酶1型是一种复杂的多亚单位酶,兼有限制性内切酶和甲基化酶的活性。而且,它首先在E。大肠杆菌菌株。此外,它由三个不同的亚基组成;HsdR、HsdM和HsdS在这里,HsdR经历限制性消化,HsdM经历甲基化,HsdS对识别位点和甲基化位点的识别都很重要。
Figure 1: EcoR I Homodimeric Structure
此外,限制性内切酶1在距离限制性内切酶识别位点1000 bp以上的随机距离处切割DNA。此外,这种随机分裂之后是DNA易位,因为这种酶作为一种分子马达。另一方面,限制性内切酶1基因在原核生物基因组中更为常见。然而,虽然限制性内切酶1型具有生物化学的重要性,但由于产生离散的限制性片段,它的实用价值不大。
限制性内切酶2型是另一种限制性内切酶,在限制性内切酶识别位点内或附近的特定位置切割DNA。此外,它的识别位点是回文和4-8个核苷酸的长度。一般来说,它是一个具有独立限制和甲基化酶活性的同型二聚体。另一方面,它只需要镁作为辅助因子而不需要ATP。
Figure 2: EcoR I Restriction Recognition Site
此外,由于限制性内切酶通过在识别位点或其附近切割产生离散片段,2型限制性内切酶更常用于实验室进行DNA分析和克隆。例如,限制性内切酶2型有几个家族具有完全不同的结构。它们包括2B、2E、2F、2G、2S和2T型限制性内切酶。
限制性内切酶3型是第三类限制性内切酶,识别两个独立的非回文序列,它们的方向相反。此外,它还将下游20-30bp的DNA切割到识别位点。一般来说,限制性内切酶3型是一个异二聚体与两个不同的亚单位。
Figure 3: Role in Restriction Enzymes in Cloning
同时,限制性和甲基化活性发生在限制性内切酶3型的同一亚基上,但很少完全消化。
限制性内切酶1型是指一种复杂的、多亚单位的、限制性内切酶和修饰性内切酶的组合,它可以随意切割远离其识别序列的DNA。限制性内切酶2型是指在接近或在其识别序列内的特定位置切割DNA的酶。另一方面,限制性内切酶类型3指的是限制性内切酶和修饰性内切酶的大量组合,它们在其识别序列之外裂解,很少给出完整的消化。
限制性内切酶1型包含三个亚单位,限制性内切酶2型是两个亚单位的同型二聚体,而限制性内切酶3型也包含一个以上的亚单位,通常是两个。
在结构上,限制性内切酶1型是一种具有限制性和甲基化酶活性的双功能酶。2型限制性内切酶具有单独的限制性内切酶和甲基化酶活性。同时,3型限制性内切酶也是一种兼有限制性和甲基化酶活性的双功能酶。
重要的是,限制和甲基化在1型限制酶中是天然的排斥反应,而限制和甲基化在2型限制酶中是两个独立的反应。但是,限制和甲基化在3型限制酶中是同时发生的反应。
1型限制性内切酶有一个二分的不对称限制性识别位点。同时,限制性内切酶2型有一个4-6bp的回文序列。另一方面,限制性内切酶3型有一个5-7bp的不对称限制性识别位点。
裂解位点是非特**的,>;在1型限制性内切酶中,与识别位点相同或相近的酶切位点位于识别位点下游24-26bp。
ATP、Mg2+和S-腺苷甲硫氨酸是1型限制酶的要求,Mg2+是2型限制酶的要求,而ATP和Mg2+是3型限制酶的要求。
在限制性内切酶1型中,切割后的DNA易位。然而,DNA易位发生在限制性内切酶2型和限制性内切酶3型中。
EcoA 1、EcoB、EcoK I和CfrA I是限制性内切酶类型1的示例,EcoR I BamH I和Hind III是限制性内切酶类型2的示例,而EcoP I、Hinf III和EcoP15 I是限制性内切酶类型3的示例。
1型限制性内切酶是一种在同一大型酶复合物中同时具有限制性和甲基化酶活性的限制性内切酶。一般来说,它由三个不同的亚基组成。此外,它的裂解位点是随机的,发生在距离识别位点约1000bp的地方。另一方面,限制性内切酶2型是另一种具有独立限制性和甲基化酶活性的限制性内切酶。此外,它是一种同源二聚体,在识别位点内或附近切割DNA。同时,限制性内切酶3型是第三类限制性内切酶。重要的是,它同时具有限制性和甲基化酶活性。然而,它是一种异二聚体,能将DNA随机切割到距离识别位点24-26bp的位置。因此,1型、2型和3型限制性内切酶的主要区别在于它们的结构和裂解方式。
1.“限制性内切酶的类型”,NEB,新英格兰生物实验室,这里提供。
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