什么是等电聚焦?(isoelectric focusing?)

等电聚焦(IEF)又称电聚焦,是一种基于电荷差异分离分子的方法。这是一种电泳现象,通过施加恒定电场,粒子可以分散在流体中。在活细胞中,等电聚焦是自然发生的,但通常在实验室中使用悬浮在凝胶中的蛋白质来重建。...
Isoelectric focusing (IEF), also called electrofocusing, is a means of separating molecules based on the differences in their electric charge.

等电聚焦(IEF)又称电聚焦,是一种基于电荷差异分离分子的方法。这是一种电泳现象,通过施加恒定电场,粒子可以分散在流体中。在活细胞中,等电聚焦是自然发生的,但通常在实验室中使用悬浮在凝胶中的蛋白质来重建。

等电聚焦分离分子的能力是基于对不同蛋白质pH值水平的理解。蛋白质的pH值可以在1到12之间。蛋白质的净电荷将由当地环境的pH值水平决定。例如,根据周围环境的pH值,蛋白质可能具有中性、正或负净电荷。

任何蛋白质的净电荷都是其正负电荷的总和。这取决于组成蛋白质的氨基链是酸性的还是碱性的。当酸性基团多于碱性基团时,产生的pH值将较低或呈酸性。当碱性基团多于酸性基团时,产生的pH值会很高,或者说是碱性的。大多数蛋白质的pH值为3-12,浓度在4-7之间。

蛋白质在pH值低于蛋白质本身的溶液中时会带正电荷。当溶液的pH值高于它们自身的pH值时,它们将带负电荷。因此,蛋白质的pH值水平称为蛋白质的等电点。等电聚焦发生在使用电场操纵蛋白质的环境时。

当电场作用于蛋白质的环境时,它会影响蛋白质中粒子的行为。这意味着当蛋白质处于与自身pH值相同的环境中时,蛋白质中的颗粒不会移动。然而,当蛋白质处于比自身pH值更低的环境中时,粒子将向阴极移动。如果蛋白质所处的环境的pH值高于自身的pH值,则这些颗粒将向阳极移动。等电聚焦需要操纵蛋白质的环境,使其颗粒朝着所需的方向移动。。

  • 发表于 2022-01-29 17:53
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  • 分类:科学

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