t4(t4)和t7 dna連線酶(t7 dna ligase)的區別

關鍵區別——t4與t7 dna連接酶

DNA連接酶是分子生物學技術中一種重要的酶。它作為一種分子粘合劑，通過在核苷酸之間形成磷酸二酯鍵來連接核苷酸。磷酸酯末端的5′端和磷酸酯端部之間形成氫鍵。DNA連接酶在連接滯後鏈的岡崎片段的複製過程中，以及在DNA修復機制和體外克隆實驗中連接載體基因組感興趣的所需基因的過程中至關重要。分子生物學家目前主要使用兩種DNA連接酶：T4和T7。t4dna連接酶是最早從T4噬菌體中分離出的酶之一。t7dna連接酶是從T7噬菌體中分離出來的一種較小的蛋白質。T7和T7的關鍵區別就是T7。

什麼是dna連接酶的作用(the action of dna ligase)？

DNA連接發生在三步反應中。第一步是對ATP的α-磷進行親核攻擊，產生一種共價酶腺苷酸中間體，其中腺苷酸與賴氨酸末端側鏈氮相連。第二步，5'-磷酸終止的DNA底物對腺苷酸酶的磷進行親核攻擊，釋放賴氨酸並形成DNA腺苷酸。最後一步，DNA腺苷酸被另一條DNA鏈的3'-OH攻擊，釋放AMP並連接多核苷酸。

什麼是t4 dna連接酶(t4 dna ligase)？

T4連接酶是第一個由Meselson、Weigle和Kellenberger分離和鑑定的連接酶，也是第一個商業化連接酶。t4dna連接酶是一種ATP依賴性酶，催化磷酸二酯鍵的形成。它是一個含有487個氨基酸殘基的單鏈多肽，分子量約77kda。其最適pH值為7.5～8。

圖01:T4 DNA連接酶

T4 DNA連接酶，顧名思義，存在於噬菌體T4中，是在噬菌體感染大腸桿菌後產生這種酶時分離出來的。該酶連接雙鏈DNA雙鏈，末端鈍，要結合的片段應該彼此靠近。

什麼是t7 dna連接酶(t7 dna ligase)？

T7連接酶是由T7噬菌體產生的41kda蛋白，通過感染大腸桿菌細胞分離得到。T7連接酶的主要功能是在克隆實驗中通過磷酸二酯鍵連接DNA雙鏈體，連接DN**段。t7dna連接酶的最適pH為7.0～7.2。T7連接酶依賴於ATP。t7dna連接酶也能退火DNA和RNA雜交體，在轉錄過程中產生異常構象；然而，這種現象仍在體外研究中。

t4(t4)和t7 dna連接酶(t7 dna ligase)的共同點

T4和t7dna連接酶通過在DN**段的3′OH端和5′磷酸端之間形成磷酸二酯鍵的方式對DNA雙工體進行退火，參與連接反應。
這兩種酶都連接著彼此接近的鈍端DNA雙工體。
這兩種酶都依賴於ATP。
這些酶是通過用特定噬菌體感染大腸桿菌細胞來分離的。
這兩種酶的應用包括：

t4(t4)和t7 dna連接酶(t7 dna ligase)的區別

T4與T7 DNA連接酶
t4dna連接酶從噬菌體T4中分離出的一種DNA連接酶，通過磷酸二酯鍵的形成參與連接相鄰的DN**段。	t7dna連接酶從噬菌體T7中分離出的一種DNA連接酶，通過磷酸二酯鍵的形成參與連接相鄰的DN**段。
蛋白質的大小
t4dna連接酶的大小為77kda，比T7連接酶大。	t7dna連接酶的大小為41kda。
最適pH值
作用於T4 DNA連接酶的pH範圍為7.5-8.0。	T7.0範圍是連接酶。

總結 - t4(t4) vs. t7 dna連接酶(t7 dna ligase)

DNA連接酶是一類重要的酶，參與分子克隆以產生含有感興趣基因的重組DNA分子。連接反應是一種能量利用反應，目前有新的研究正在進行中，通過調節可用的連接酶來提高準確度。T4和t7dna連接酶是分子生物學技術中兩類重要的DNA連接酶。t7dna連接酶也是基於從T4感染大腸桿菌中分離出的一級連接酶的研究結果。T7由於其體積較小，在執行其功能時表現出更高的效率和準確性。這就是T4和T7連接酶之間的區別。

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引用

1“DNA連接酶，T4。”DNA連接酶，T4–沃辛頓酶手冊，可從這裡獲得。訪問日期：2017年8月22日。Doherty，Aidan J.等人。“噬菌體t7dna連接酶的過度表達、純化、結晶和特性鑑定”，《生物化學雜誌》，1996年5月10日，可在這裡查閱。訪問日期：2017年8月22日。
2Doherty，Aidan J.等人。“噬菌體T7 DNA連接酶的過度表達、純化、結晶和特性鑑定”，《生物化學雜誌》，1996年5月10日，