关键区别——t4与t7 dna连接酶
DNA连接酶是分子生物学技术中一种重要的酶。它作为一种分子粘合剂，通过在核苷酸之间形成磷酸二酯键来连接核苷酸。磷酸酯末端的5′端和磷酸酯端部之间形成氢键。DNA连接酶在连接滞后链的冈崎片段的复制过程中，以及在DNA修复机制和体外克隆实验中连接载体基因组感兴趣的所需基因的过程中至关重要。分子生物学家目前主要使用两种DNA连接酶：T4和T7。t4dna连接酶是最早从T4噬菌体中分离出的酶之一。t7dna连接酶是从T7噬菌体中分离出来的一种较小的蛋白质。T7和T7的关键区别就是T7。
目录
1. 概述和主要区别
2. DNA连接酶的作用是什么
3. 什么是T4 DNA连接酶
4. 什么是t7dna连接酶
4. T4与T7连接酶的相似性
5. 并列比较-T4与T7 DNA连接酶的列表形式
6. 摘要
什么是dna连接酶的作用(the action of dna ligase)？
DNA连接发生在三步反应中。第一步是对ATP的α-磷进行亲核攻击，产生一种共价酶腺苷酸中间体，其中腺苷酸与赖氨酸末端侧链氮相连。第二步，5'-磷酸终止的DNA底物对腺苷酸酶的磷进行亲核攻击，释放赖氨酸并形成DNA腺苷酸。最后一步，DNA腺苷酸被另一条DNA链的3'-OH攻击，释放AMP并连接多核苷酸。
什么是t4 dna连接酶(t4 dna ligase)？
T4连接酶是第一个由Meselson、Weigle和Kellenberger分离和鉴定的连接酶，也是第一个商业化连接酶。t4dna连接酶是一种ATP依赖性酶，催化磷酸二酯键的形成。它是一个含有487个氨基酸残基的单链多肽，分子量约77kda。其最适pH值为7.5～8。
图01:T4 DNA连接酶
T4 DNA连接酶，顾名思义，存在于噬菌体T4中，是在噬菌体感染大肠杆菌后产生这种酶时分离出来的。该酶连接双链DNA双链，末端钝，要结合的片段应该彼此靠近。
什么是t7 dna连接酶(t7 dna ligase)？
T7连接酶是由T7噬菌体产生的41kda蛋白，通过感染大肠杆菌细胞分离得到。T7连接酶的主要功能是在克隆实验中通过磷酸二酯键连接DNA双链体，连接DN**段。t7dna连接酶的最适pH为7.0～7.2。T7连接酶依赖于ATP。t7dna连接酶也能退火DNA和RNA杂交体，在转录过程中产生异常构象；然而，这种现象仍在体外研究中。
t4(t4)和t7 dna连接酶(t7 dna ligase)的共同点
- T4和t7dna连接酶通过在DN**段的3′OH端和5′磷酸端之间形成磷酸二酯键的方式对DNA双工体进行退火，参与连接反应。
- 这两种酶都连接着彼此接近的钝端DNA双工体。
- 这两种酶都依赖于ATP。
- 这些酶是通过用特定噬菌体感染大肠杆菌细胞来分离的。
- 这两种酶的应用包括：
t4(t4)和t7 dna连接酶(t7 dna ligase)的区别
| T4与T7 DNA连接酶 | |
| t4dna连接酶从噬菌体T4中分离出的一种DNA连接酶，通过磷酸二酯键的形成参与连接相邻的DN**段。 | t7dna连接酶从噬菌体T7中分离出的一种DNA连接酶，通过磷酸二酯键的形成参与连接相邻的DN**段。 |
| 蛋白质的大小 | |
| t4dna连接酶的大小为77kda，比T7连接酶大。 | t7dna连接酶的大小为41kda。 |
| 最适pH值 | |
| 作用于T4 DNA连接酶的pH范围为7.5-8.0。 | T7.0范围是连接酶。 |
总结 - t4(t4) vs. t7 dna连接酶(t7 dna ligase)
DNA连接酶是一类重要的酶，参与分子克隆以产生含有感兴趣基因的重组DNA分子。连接反应是一种能量利用反应，目前有新的研究正在进行中，通过调节可用的连接酶来提高准确度。T4和t7dna连接酶是分子生物学技术中两类重要的DNA连接酶。t7dna连接酶也是基于从T4感染大肠杆菌中分离出的一级连接酶的研究结果。T7由于其体积较小，在执行其功能时表现出更高的效率和准确性。这就是T4和T7连接酶之间的区别。
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引用
1“DNA连接酶，T4。”DNA连接酶，T4–沃辛顿酶手册，可从这里获得。访问日期：2017年8月22日。Doherty，Aidan J.等人。“噬菌体t7dna连接酶的过度表达、纯化、结晶和特性鉴定”，《生物化学杂志》，1996年5月10日，可在这里查阅。访问日期：2017年8月22日。
2Doherty，Aidan J.等人。“噬菌体T7 DNA连接酶的过度表达、纯化、结晶和特性鉴定”，《生物化学杂志》，1996年5月10日，
