尼克翻译公司(nick translation)和端部填充(end filling)的区别

缺口翻译和末端填充的关键区别在于，缺口翻译是一种为各种杂交反应创建标记的DNA探针的过程，而末端填充是一种通过在单链悬垂中添加核苷酸来生成钝化片段的技术。

缺口翻译和末端填充是分子生物学中常用的两种技术。缺口翻译用于标记杂交探针，以检测特定的核苷酸序列。端部填充被用来**钝的碎片，这些碎片有粘性的末端和单股的悬垂部分。这两种技术都非常重要，它们通常在分子研究实验室中进行。

什么是尼克翻译公司(nick translation)？

缺口翻译是一种重要的DNA标记方法，用于制备各种分子生物学技术，如印迹法、原位杂交法、荧光原位杂交法等。DNA探针用于识别特定的DNA或RNA序列。在标记探针的帮助下，可以从复杂的核酸混合物中标记或可视化特定片段。因此，使用各种技术制备标记探针。缺口翻译是一种利用DNA酶1和DNA聚合酶1酶产生标记探针的方法。

尼克翻译公司(nick translation)和端部填充(end filling)的区别

图01：尼克翻译

缺口翻译过程始于DNase-1酶的活性。DNase 1通过切割核苷酸之间的磷酸二酯键，在双链DNA的磷酸主链上引入刻痕。一旦缺口形成，核苷酸的3′OH自由基将产生，DNA聚合酶1酶将作用于它。DNA聚合酶1的5′至3′核酸外切酶活性从缺口处向DNA链的3′方向去除核苷酸。

同时，DNA聚合酶1酶的多聚酶活性起作用，并添加核苷酸来取代去除的核苷酸。如果核苷酸被标记，则被标记的核苷酸取代，并标记DNA以供识别。最后，这种新合成的标记DNA可作为探针用于各种杂交反应。

什么是端部填充(end filling)？

末端填充是分子生物学中用来**钝化碎片的一种技术。限制性消化产生带有悬垂物的碎片。这些片段可能与连接到质粒载体上不相容。矢量通常被钝化，以允许连接不兼容的端部。因此，可以通过在互补链上添加核苷酸来钝化具有悬垂的片段，并将其作为聚合模板。这就是所谓的结束填充过程。

DNA聚合酶I和T4 DNA聚合酶的Klenow片段等DNA聚合酶对末端填充起催化作用。他们加入核苷酸来填充（5′→3′），然后咀嚼（3′→5′）。一旦粘性的末端被填满，它们就会变得钝，并且准备将其连成向量。

此外，末端填充可以用来标记DNA分子。然而，它只能用来标记带有粘性末端的DNA分子。与缺口翻译相比，末端填充是一种温和的方法，很少导致DNA断裂。

尼克翻译公司(nick translation)和端部填充(end filling)的共同点

缺口翻译和末端填充都是分子生物学技术。
它们可以用来标记探针。
两者都是体外培养的

尼克翻译公司(nick translation)和端部填充(end filling)的区别

缺口翻译是一种为杂交创造标记探针的技术。相反，端部填充是一种技术，它能产生钝的碎片，用于连接成载体。所以，这就是刻痕翻译和结尾填充的关键区别。此外，缺口翻译需要使用5′至3′核酸外切酶活性，而端部填充不需要5′至3′核酸外切酶活性。

下面的信息图表更详细地列出了切口翻译和结尾填充之间的差异。

尼克翻译公司(nick translation)和端部填充(end filling)的区别

总结 - 尼克翻译公司(nick translation) vs. 端部填充(end filling)

缺口翻译是一种将放射性标记的核苷酸结合到DNA中的方法。它根据DNA酶1和大肠杆菌DNA聚合酶1酶的活性合成标记探针。另一方面，末端填充是一种产生钝碎片的技术。当碎片有粘性末端（单股悬垂物）时，有必要使其钝端以便连接成载体。末端填充增加了相容的核苷酸，并产生钝的末端片段，以便使它们与结扎相兼容。因此，本文总结了缺口翻译和结尾填充的区别。