尼克翻译公司(nick translation)和底漆延伸(primer extension)的区别

缺口翻译和引物延伸是分子生物学中的两项重要技术。缺口翻译和引物延伸的关键区别在于，缺口翻译过程为其他杂交技术产生了标记探针，而引物延伸法则从混合物中识别出特定的RNA序列，并揭示了mRNA的表达信息。这两种技术都非常重要，通常在分子研究实验室中进行。

内容1。概述和关键差异2。尼克翻译3是什么。什么是底漆延伸4。并排比较–Nick Translation与Primer Extension5。摘要

什么是尼克翻译公司(nick translation)？

缺口翻译是一种重要的DNA标记方法，用于制备各种分子生物学技术，如印迹法、原位杂交法、荧光原位杂交法等。DNA探针用于识别特定的DNA或RNA序列。在标记探针的帮助下，可以从复杂的核酸混合物中标记或可视化特定片段。因此，使用各种技术制备标记探针，以用于不同的技术。缺口翻译是一种利用DNA酶1和DNA聚合酶1酶产生标记探针的方法。

缺口翻译过程始于DNase-1酶的活性。DNase 1通过切割核苷酸之间的磷酸二酯键，在双链DNA的磷酸主链上引入刻痕。一旦缺口形成，就会产生游离的3'羟基核苷酸，DNA聚合酶1酶将作用于它。DNA聚合酶1的5′至3′核酸外切酶活性从缺口向DNA链的3′方向去除核苷酸。同时加入聚合酶1的核苷酸，以取代聚合酶的活性。如果核苷酸被标记，则会被标记的核苷酸取代，并标记DNA以供识别。这种新合成的标记DNA可作为分子生物学中各种杂交反应的探针。

图01：刻痕翻译过程

什么是底漆延伸(primer extension)？

引物延伸是一种从RNA混合物中寻找特定RNA序列并定位mRNA转录物5'端的技术。它也被用来研究RNA的结构和表达。引物延伸法是用标记引物或标记核苷酸进行的。如果使用标记引物，则不需要标记用于cDNA合成的核苷酸。这项技术有几个步骤。它首先从样本中提取RNA。然后将标记的寡核苷酸引物与必要的成分一起添加到混合物中，以合成特定RNA序列的cDNA。底漆退火与互补序列的混合物。以引物退火序列为模板，酶逆转录酶合成RNA序列的互补DNA（cDNA）。引物退火和反转录只有在样品中存在特定的RNA序列时才会发生。最后，当进行变性凝胶电泳时，可以确定RNA序列的大小。用引物延伸法也很容易找到mRNA（转录起始位点）序列的+1碱基。如果使用过量的引物，样品中存在的mRNA量可以用这种方法定量。

图02：底漆延伸

尼克翻译(nick translation)和底漆延伸(primer extension)的区别

总结 - 尼克翻译公司(nick translation) vs. 底漆延伸(primer extension)

缺口翻译是一种基于DNA酶1和大肠杆菌DNA聚合酶1酶活性合成标记探针的方法。它是在不同杂交技术之前在实验室中使用的一种体外方法。在缺口翻译过程中，DNA聚合酶1的5'-3'核酸外切酶活性去除缺口前面的核苷酸，DNA聚合酶1的聚合酶活性用缺口后面的标记核苷酸代替去除的核苷酸。引物延伸法是一种从混合物中检测特定RNA转录物并量化感兴趣RNA的大小和数量的方法。尼克和引文之间的区别就在于翻译。

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