主差探头(main difference probe) vs. 底漆(primer)

PCR是一种用于生物技术中的技术，用于各种目的扩增特定的DN**段。探针和引物是两种单链寡核苷酸，用于各种类型的PCR。探针主要用于qPCR，而合成引物用于各种PCR。探针和引物的主要区别在于探针是通过与双链DNA杂交来检测混合物中是否存在特定的DN**段，而引物是通过与单链DNA杂交来启动聚合酶链反应的。通常，引物用于启动细胞内的DNA复制。探针也用于杂交反应。

覆盖的关键领域

1.什么是探针-定义、设计、重要性2.什么是底漆-定义、设计、重要性3.探针和底漆的相似之处是什么-共同特征概述4.探针和底漆的区别是什么-主要区别比较

关键词：杂交，寡核苷酸，PCR，引物，探针，QPCR

什么是探针(a probe)？

探针是一个DNA或RNA的片段，用于检测样本中是否存在特定的DN**段。因此，探针可用于两种技术，即qPCR和杂交反应。在设计探针时，应考虑四个事实。

1. 位置-探针应与反向或正向引物附近的DNA链杂交。但不应与引物结合位点重叠。一般来说，探针与DNA双链的任一链杂交。
2. 熔化温度（Tm）–探头的熔化温度应为6-8℃°C高于引物。
3. 退火温度（Ta）–实验的退火温度应为5℃°低于底漆的熔化温度。
4. GC含量–探针的GC含量应为35-65%。探针的5′端不应包含G。

在qPCR中，探针用荧光染料或放射性元素标记。这些探针与DNA双链中的目标序列杂交。不同类型的标记探针，无论是放射性元素还是荧光，也用于各种类型的杂交反应。PNA探针与其靶序列的杂交如图1所示。PNA探针用于确定端粒的长度。

Figure 1: Hybridization of PNA Probes

在杂交过程中，探针以互补的方式与单链DNA结合。

什么是底漆(a primer)？

引物是指作为DNA合成起点的DNA或RNA短链。RNA引物在DNA聚合酶的帮助下在细胞内启动DNA复制。合成的DNA引物主要用于PCR扩增所需的DN**段。靶序列两侧有两个引物，称为正向引物和反向引物。特**和互补性是设计引物的主要因素。二级结构也应避免。设计底漆时应考虑的其他因素如下所述。

1. 熔化温度（Tm）–正向和反向底漆的最佳熔化温度应为60-64°C.
2. 退火温度——实验的退火温度应为5℃°低于每种底漆的熔化温度。
3. GC含量-引物的GC含量应为35-65%。

正向和反向引物对目标DNA两条链的退火如图2所示。

Figure 2: Primer Annealing

在DNA测序中，引物用于扩增目标片段。引物可以用放射性元素或荧光标记，用于各种检测目的。

探针和引物的相似性

• 探针和引物是两种单链寡核苷酸，用于各种PCR技术与互补DNA杂交。
• 探针和引物都对特定的DN**段有特**。
• 探针和引物都可以是DNA/RNA。
• 探针和引物都有特定的退火温度。
• 探针和引物都可以与荧光团缠绕在一起进行检测。

探查(probe)和底漆(primer)的区别

定义

探针：探针是DNA或RN**段，用于检测样本中是否存在特定的DN**段。

引物：引物是DNA或RNA的短链，作为DNA合成的起点。

角色

探针：探针用于检测qPCR中的特定DN**段。

引物：用于启动DNA复制的引物。它也用于启动PCR。

长度

探针：探针的长度范围为25-1000个碱基对。

引物：引物的长度可以在18-22碱基对之间。

杂交

探针：探针与双链DNA杂交。

引物：引物与单链DNA杂交。

标记

探针：探针通常用荧光标记进行检测。

底漆：可根据用途标记底漆。

结论

探针和引物是两种用于各种PCR的单链寡核苷酸。探针用于qPCR****DN**段的检测。引物用于启动细胞内的DNA复制，也用于启动PCR。因此，探针和底漆的主要区别在于它们的用途。

引用

1.设计PCR引物和探针，集成DNA技术，可在此获得。