关键区别-正向和反向启动
聚合酶链反应(PCR)是一种应用于分子生物学的DNA扩增方法。这是一种常用的技术,可以将一个特别感兴趣的DNA序列复制成数百万到数十亿个拷贝。这是一种在实验室进行的体外方法。PCR技术完全依赖于商业生产的称为Taq聚合酶的DNA聚合酶。它还需要其他几个部件和适当的温度维持。一个重要的组成部分是引物。引物是专为目标DNA序列设计的短DNA序列。它们的长度通常在20个核苷酸左右。Taq聚合酶催化将核苷酸加入到已有的核苷酸序列中。因此,引物是合成新链的起点。Taq聚合酶只在5'到3'方向工作,因此DNA的合成也发生在相同的5'到3'方向。由于DNA是双链的,PCR需要两种引物。它们被称为正向底漆和反向底漆。正向引物和反向引物是根据DNA合成时引物在DNA中的延伸方向来命名的。前向引物与反义DNA链退火,并启动基因+ve链的合成,使其向5′至3′方向合成。反向引物退火与正义链,并开始合成互补链的编码链;这是-ve链的基因链到5'至3'方向。这是正向引物和反向引物之间的关键区别。
目录
1. 概述和主要区别
2. 什么是前进入门
3. 什么是反向底漆
4. 正反序引物的相似性
5. 并排比较-表格形式的正向和反向底漆
6. 摘要
什么是前向***(a forward primer)?
正向定向是基因编码链或意义链的合成。Taq聚合酶催化5'到3'方向的新链的合成。当引物与非编码链或反义链退火并沿5′到3′方向伸长时,编码链的合成就发生了。
与反义链、非编码链或模板链退火的引物称为前向引物,因为前向引物是合成基因编码链或正链的起点。前向引物有一个短的核苷酸序列,与反义链的3'侧端互补。它与反义链杂交并促进Taq聚合酶添加与模板链互补的核苷酸。
什么是反向起爆剂(a reverse primer)?
反向引物(Reverse primer)是一种短的DNA序列,它与3′端的正义链或编码链进行退火。反向引物是合成编码序列或非编码序列互补链的起点。反向引物的设计与编码链的3'端互补。因此,它与编码链两侧3'端退火,并允许Taq聚合酶合成反义链或模板链。由于它的方向是相反的,所以这个底漆被标记为反向底漆。
这两个重要的引物的目标区域都是数十亿的正向或反向拷贝。
向前地(forward)和反向底漆(reverse primer)的共同点
- 正、反向引物均由寡核苷酸组成。
- 正向和反向引物都具有短的核苷酸序列,与DNA双链的侧端互补。
- 正向和反向引物通常由20个核苷酸组成。
- 正向和反向引物都用于聚合酶链反应。
- 正、反向引物均已商业化合成。
- 正向和反向引物温度稳定,通常具有相似的Tm。
- 正向和反向引物均与目标DNA序列退火。
- 根据PCR反应设计了正向和反向引物。
- 正向和反向引物都是DNA扩增的起点。
- 反向和正向引物对于产生数百万个特定区域的靶向或感兴趣的DNA序列非常重要。
向前地(forward)和反向底漆(reverse primer)的区别
正向底漆与反向底漆 | |
前向引物(Forward primer)是与基因的非编码序列或模板链的3'端杂交,作为合成编码序列的起点的短DNA序列。 | 反向引物(Reverse primer)是指与编码的3′端或非模板链杂交,作为合成非编码序列的起点的短DNA序列。 |
退火钢绞线 | |
带模板链的前底漆退火。 | 用非模板钢绞线进行反向底漆退火。 |
生成新序列 | |
前向引物有助于编码序列的合成。 | 反向引物有助于非编码序列的合成。 |
总结 - 向前地(forward) vs. 反向底漆(reverse primer)
PCR技术涉及两种类型的引物。它们是正向和反向引物。根据新DNA链合成中引物的延伸率,对这些引物进行标记或命名。Taq聚合酶以5'到3'方向合成新的DNA。因此,引物设计为与双链的3'端互补。前向引物与反义序列、模板或非编码序列的3′端杂交。它是合成编码序列的起点。反向引物以5'到3'方向伸长,与编码的3'端或非模板或感觉链杂交。它是合成非编码序列的起点。这就是前进档和倒车档的区别。
引用
1.“初级(分子生物学)。”维基百科,维基媒体基金会,2018年2月20日。这里有2。“聚合酶链反应(PCR)”,可汗学院。此处提供
2.“聚合酶链反应(PCR)”,可汗学院。